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人結直腸癌肺轉移細胞；T84復蘇

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更新時間：2017-01-23 09:32:33瀏覽次數(shù)：240次

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產(chǎn)品簡介

人結直腸癌肺轉移細胞；T84復蘇現(xiàn)貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明，歡迎前來選購！

詳細介紹

人結直腸癌肺轉移細胞；T84復蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱 人結直腸癌肺轉移細胞；T84復蘇
形態(tài)特性   上皮細胞
生長特性貼壁生長
特征特性   T84細胞株是從一位72歲男性結腸癌患者的肺轉移灶建立的可移植人類癌細胞株。腫瘤組織皮下接種于BALB/c裸鼠，并連續(xù)進行移植。 [26072］在裸鼠身上的移植過程中，細胞株始終保持結腸癌的原始組織性狀。 [26072］在無胸腺小鼠中傳代23代后建立了T84細胞株。這些細胞單層生長到飽和并在接觸細胞間展現(xiàn)出緊密連接和橋粒。 [1155] 有很多關于多肽類激素和神經(jīng)遞質并維持定向電解質傳輸?shù)膱蟮馈?[1155］這株細胞展現(xiàn)了接觸細胞中的緊密連接和橋粒。 [1155］角蛋白免疫過氧化物
培養(yǎng)條件   DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  優(yōu)質胎牛血清，5%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(53+5)
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
	貼壁生長	上海	3－5天

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
ASAH1   酸神經(jīng)酰胺酶1抗體
ADRM1   粘附調(diào)節(jié)分子1抗體
Aphrodisin   氣味結合蛋白抗體
ALDH2   乙醛脫氫酶2抗體
Annexin A10   膜粘連蛋白10抗體
Anterior Gradient 2   前梯度同源蛋白2抗體
ALDH1B1   乙醛脫氫酶5抗體
ALF   通用轉錄因子IIA樣因子抗體
ATG4D   自噬相關蛋白4D抗體
ATG9A   自噬相關蛋白9A抗體
Aldolase C   醛縮酶C抗體
Aspartate Aminotransferase   谷草轉氨酶抗體
ABCG5   三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員5抗體
ABCG8   三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員8抗體
ACADL   酰基*脫氫酶長鏈抗體伊紅*乳糖蔗糖瓊脂
ENDO agar ENDO氯脂   1.04044.0504   MERCK默克
M-ENDO agar LES 膜過濾ENDO瓊脂   1.11277.0505   MERCK默克
M-ENDO broth 膜過濾ENDO肉湯   1.10750.0500   MERCK默克
Membrane-fiter Enterococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLEY(base) 膜過濾腸球菌選擇瓊脂（基礎）   1.05289.0500   MERCK默克
Membrane-fiter Enterococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLE   1.05262.0500   MERCK默克
膜過濾腸球菌選擇瓊脂
Esculin bile agar 七葉苷膽鹽瓊脂   1.11432.0500   MERCK默克
Thioglycolate medium G 疏基乙酸鹽培養(yǎng)基G   1.16761.0500   MERCK默克
Fluid thilglycolate medium 疏基乙酸鹽培養(yǎng)基   1.08191.0500   MERCK默克
FRASER Listeria Selective Enrichment Broth( base)   1.10398.0500   MERCK默克
弗雷澤李斯特菌選擇富集肉湯（基礎）
FRASER Listeria Selective Supplement 弗雷澤李斯特菌選擇添加劑   1.10399.0001   MERCK默克
Agar for fungi acc.to KIMMIG( base) modified 真菌改性瓊脂（氯化）   1.05414.0500   MERCK默克
Agar GASSNER Water-blue metachrome-yellow lactose agar acc.to GASSNER GASSNER 瓊脂/水溶藍偏烙黃乳糖瓊脂   1.01282.0500   MERCK默克
GLOLITTI-CANTONI broth Staphylococcus enrichment broth base GLOLITTI-CANTONI 肉湯/葡萄糖球菌富集肉湯基礎   1.10675.0500   MERCK默克