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人肝腹水腺癌細胞；SK-HEP-1特性

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更新時間：2017-01-21 14:09:23瀏覽次數(shù)：248次

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產(chǎn)品簡介

人肝腹水腺癌細胞；SK-HEP-1特性，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明，歡迎前來選購！

詳細介紹

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
人肝腹水腺癌細胞；SK-HEP-1特性	貼壁生長	上海	3－5天

細胞名稱 人肝腹水腺癌細胞；SK-HEP-1特性
形態(tài)特性   上皮細胞
生長特性貼壁生長
特征特性   SK-HEP-1細胞系已被鑒定為內(nèi)皮來源。該細胞系為異倍體女性人（XX），染色體在亞三倍體范圍內(nèi)。在裸鼠中，它能形成與肝癌相*的大細胞癌。
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(22+5)
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測陰性
STR   Amelogenin:X；CSF1PO:11,12；D13S317:8,12；D16S539:12；D18S51:13,15；D19S433:12,15.2；D21S11:29,31；D2S1338:20,23；D3S1358:16；D5S818:10,13；D7S820:8,11；D8S1179:13,14；FGA:17；TH01:7,9；TPOX:9；vWA:14,17
同工酶
染色體
使用權限 A類

來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
人細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
m-TEC瓊脂   m-TEC Agar   250   用于水中耐熱細菌濾膜計數(shù)(Acumedia方法)
MR-VP培養(yǎng)基    Methyl Red Voges Proskauer Broth   250   用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗(SN標準)
MKTTn 肉湯   MKTTn Broth   250   用于食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌(ISO標準)
MIO培養(yǎng)基   MIO Medium   250   用于動力、吲哚和*試驗(FDA方法)
mEC 肉湯     mE.Coli Broth   250   用于0157選擇性增菌(USDA-FSIS方法)
mCPC培養(yǎng)基添加劑   mCPC Medium Supplement   1ml*5   每瓶添加于100ml mCPC培養(yǎng)基中
mCPC 培養(yǎng)基   mCPC Medium   250   用于弧菌分離培養(yǎng)(FDA標準)
M –肉湯   M-Broth   250   用于干燥食品和種子中沙門氏菌增菌培養(yǎng)(MERCK方法)
Littman 瓊脂   Littman Agar   250   用于真菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
LES Endo 瓊脂   m-Endo Agar，LES   250g   用于濾膜細菌計數(shù)(Merck方法)STARD5   英文名稱：   促黃體激素誘導蛋白5抗體   ?0.2ml
Sca1   英文名稱：   T淋巴細胞激活蛋白抗體   ?0.2ml
Phospho-RPS6 (Ser235+Ser236)   英文名稱：   磷酸化S6核糖體蛋白抗體   ?0.1ml
Phospho-MEK4 (Ser257)   英文名稱：   磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體   ?0.1ml
Phospho-MEK4 (Thr261)   英文名稱：   磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體   ?0.1ml
Phospho-MEK4 (Ser257 + Thr261)   英文名稱：   磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體   ?0.1ml
SGK1   英文名稱：   糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體   ?0.1ml
Phospho-PLC beta3 (Ser537)   英文名稱：   磷酸化磷酯酶Cβ3抗體   ?0.1ml
Phospho-SMC1(Ser957)   英文名稱：   磷酸化染色體結構維持蛋白質(zhì)１抗體   ?0.1ml
SLC6A19   英文名稱：   鉀依賴鈉鈣交換蛋白6抗體   ?0.1ml