人肝癌細(xì)胞；BEL-7404特性來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
| 產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
| 人肝癌細(xì)胞；BEL-7404特性 | 貼壁生長(zhǎng) | 上海 | 3－5天 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 用Northern blot方法，未能檢測(cè)到細(xì)胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表達(dá)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR Amelogenin:X；CSF1PO:9,10；D13S317:12,13.3；D16S539:9,10；D18S51:16；D19S433:13,14；D21S11:27,28；D2S1338:17；D3S1358:18；D5S818:11,12；D7S820:8,12；D8S1179:12；FGA:21TH01:7；TPOX:8,12；vWA:16,18
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
VAX2 英文名稱： 視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX2抗體 ?0.2ml
Vitamin D Receptor/VDR 英文名稱： *3受體抗體 ?0.1ml
VPREB1 英文名稱： B淋巴細(xì)胞前體蛋白1抗體 ?0.2ml
VCAM-1 英文名稱： 血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子抗體 ?0.1ml
VNN2 英文名稱： 血管非炎蛋白2抗體 ?0.2ml
VHLH 英文名稱： 腦視網(wǎng)膜血管瘤G7蛋白抗體（逢希伯-林道氏?。?nbsp; ?0.2ml
VGLUT1/BNP1 英文名稱： 腦特異鈉依賴無機(jī)磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 ?0.2ml
VMAT2 英文名稱： 腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 ?0.2ml
VHL 英文名稱： 腦視網(wǎng)膜血管瘤G7蛋白抗體（逢希伯-林道氏?。?nbsp; ?0.1ml
VANGL2 英文名稱： 神經(jīng)管畸形相關(guān)蛋白VANGL2抗體 ?0.2ml
Phospho-VASP(Ser239) 英文名稱： 磷酸化血管擴(kuò)張刺激磷蛋白抗體 ?0.1mlWORT瓊脂 WORT Agar 250克 用于真菌,特別是酵母菌的計(jì)數(shù)和增菌培養(yǎng)
WORT肉湯 WORT Broth 250克 真菌和酵母菌的培養(yǎng)
Littman瓊脂 Littman Agar 250克 真菌的分離培養(yǎng)
YM肉湯 YM Broth 250克 BR
*葡萄糖酵母粉瓊脂基礎(chǔ) OGY Agar 250克 霉菌、酵母菌分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
華倫斯坦實(shí)驗(yàn)室營(yíng)養(yǎng)瓊脂 WL Nutrient Agar 250克 啤酒和發(fā)酵產(chǎn)品中酵母菌和細(xì)菌的計(jì)數(shù)
沙氏腦心浸液瓊脂 Sabouraud BHI Agar 250克 真菌檢測(cè)
菌種培養(yǎng)基 Strain Medium（For B.Cerus） 250克 四環(huán)素檢測(cè)中蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)
四環(huán)素檢定瓊脂 Tetracyline Examination Agar 250克 副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)
葡萄糖胰酪胨瓊脂 Dextrose Tryptone Agar 250克 嗜熱菌芽孢（需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢）分離培養(yǎng)
MYP瓊脂基礎(chǔ) MYP agar base 250克 蠟樣芽孢桿菌的固體平板計(jì)數(shù)
SPS瓊脂 SPS Agar 250克 產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)
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