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人永生化表皮細(xì)胞；HaCaT特性

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產(chǎn)品簡介

人永生化表皮細(xì)胞；HaCaT特性現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細(xì)介紹

人永生化表皮細(xì)胞；HaCaT特性來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
人永生化表皮細(xì)胞；HaCaT特性	成纖維細(xì)胞樣	上海	3－5天

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性   上皮細(xì)胞樣
生長特性貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞源自一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚，角蛋白、角化細(xì)胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關(guān)蛋白陽性。
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  15%FBS
傳代方法   1:10～1:20傳代，每周換液2～3次
傳代情況 C2
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測培養(yǎng)法（-）
STR   Amelogenin：X；CSF1PO：9，11；D13S317：10，12；D16S539：9，12；D18S51：12；D19S433：13，14；D21S11：30.2；D2S1338：17，25；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：9，11；D8S1179：14；FGA：24；TH01：9.3；TPOX：11，12；vWA：16，17，OL；
同工酶
染色體   72～88
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
GPR102    英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體GPR102蛋白抗體   ?0.2ml
GPR37L1   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體GPR37樣蛋白1抗體   ?0.2ml
GPR105    英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體GPR105蛋白抗體   ?0.2ml
GPR12    英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體GPR12蛋白抗體   ?0.2ml
GPR110 protein   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體GPR110蛋白抗體   ?0.2ml
GPR125    英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體GPR125蛋白抗體   ?0.2ml
GPCR RTA   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體RTA蛋白抗體   ?0.2ml
GPR155   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體GPR155蛋白抗體   ?0.2ml
GPR30   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體GPR30蛋白抗體   ?0.2ml
GPR86   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體GPR86蛋白抗體   ?0.2ml
GPCR HM74   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體HM74蛋白抗體   ?0.2ml
GMCL1L   英文名稱：   細(xì)胞樣蛋白1樣蛋白抗體   ?0.2ml
phospho-GAB2 (Tyr452)   英文名稱：   磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體   ?0.1ml
phospho-GAB2 (Tyr643)   英文名稱：   磷酸化接頭蛋白Gab2抗體   ?0.1mlsm Actinin- Alpha(Human skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit 人橫紋肌輔肌動蛋白α   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
BMP-7(Human Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit 人骨成型蛋白7   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3)ELISA Kit 人25羥基*3   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
LTB4(Human Leukotriene B4) ELISA Kit 人白三烯B4   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人腸脂肪酸結(jié)合蛋白   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit 人骨髓抑制因子1   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂聯(lián)素   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人組胺   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特異堿磷酸酶B   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit 人骨鈣素/骨*蛋白   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T