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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-01-19 13:54:31瀏覽次數(shù):266次
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人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5特性現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5特性 | 成纖維細(xì)胞樣 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 MRC-5細(xì)胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織,該細(xì)胞老化前能傳代42~46個(gè)倍增時(shí)間。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:5傳代;每周1~2次。
傳代情況 P20
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:11,14;D16S539:9,11;D18S51:15,21;D19S433:14,15;D21S11:31.2;D2S1338:20;D3S1358:15,17;D5S818:11,12;D7S820:10,11;D8S1179:13;FGA:21,23;TH01:8;TPOX:8;vWA:15;
同工酶
染色體 46,XY,部分細(xì)胞為亞二倍體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
豬前列腺素G/H合酶2(PTGS2)免疫試劑盒 Pig prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2 ELISA kit
豬前列腺素F2α(PGF2α)免疫試劑盒 Pig Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit
豬前列腺素E2(PGE2)免疫試劑盒 Pig Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit
豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)免疫試劑盒 Pig Glucose transporter 2,GLUT2 ELISA Kit
豬皮質(zhì)抑素/*穩(wěn)定蛋白(CORT)免疫試劑盒 Pig cortistatin,CORT ELISA kit
豬皮質(zhì)酮(CORT)免疫試劑盒 Porcine Corticosterone,CORT ELISA Kit
豬皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白(SERPINA6)免疫試劑盒 Pig Corticosteroid-binding globulin,SERPINA6 ELISA kit
豬*(Cortisol)免疫試劑盒 Porcine Cortisol ELISA Kit
豬*XIIIB鏈(F13B)免疫試劑盒 Pig Coagulation factor XIII B chain,F13B ELISA kit
豬*XIIIA鏈(F13A1)免疫試劑盒 Pig Coagulation factor XIII A chain,F13A1 ELISA kit
豬*X(F10)免疫試劑盒 Pig coagulation factor X,F10 ELISA kit
豬*ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫試劑盒 Pig coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit
豬*Ⅶ(FⅦ)免疫試劑盒 Pig coagulation factor Ⅶ,FⅦ ELISA Kit
豬*Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒 Pig coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit
豬*抗*復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒 Pig thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit
豬腦鈉素(BNP)免疫試劑盒 Porcine brain natriuretic peptide,BNP ELISA Kit
豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(SGLT1)免疫試劑盒 Pig sodium-glucose cotransporter 1,SGLT1 ELISA Kit
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)免疫試劑盒 Pig Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit
豬內(nèi)皮素1(ET-1)免疫試劑盒 Porcine endothelin 1,ET-1 ELISA Kit
豬末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒 Pig terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit
豬繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)免疫試劑盒 Pig anti-Mullerian hormone,AMH ELISA kit
豬免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒 Porcine Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit
豬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒 Porcine Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
ABCA2 英文名稱: 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 0.2ml
ApoB 英文名稱: 載脂蛋白B抗體 0.1ml
ALOX15B 英文名稱: 花生四烯酸15脂氧合酶2抗體 0.2ml
APOC4 英文名稱: 載脂蛋白C4抗體 0.2ml
ARH 英文名稱: 低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體 0.2ml
AUP1 英文名稱: 原始廣泛存在蛋白1抗體 0.2ml
ANKRD37 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體 0.2ml
A4GALT 英文名稱: α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1 0.2ml
AGTRAP 英文名稱: 血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
AX2R 英文名稱: 膜粘連蛋白2受體抗體 0.2ml
ACEI 英文名稱: 血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體 0.1ml
AATF 英文名稱: 拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.2ml
AACT-Alpha1 英文名稱: α-1抗胰*抗體 0.1ml
alpha 1 Antitrypsin 英文名稱: α-1抗*抗體 0.1ml
ABCB6 英文名稱: ATP結(jié)合蛋白家族6抗體 0.1ml
ABCG1 英文名稱: 三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體 0.1ml
Adiponectin receptor 2 英文名稱: 脂聯(lián)素受體2抗體 0.1ml
ANGEL1 英文名稱: ANGEL1蛋白抗體 0.2ml
ANGEL2 英文名稱: ANGEL2蛋白抗體 0.2ml
ANKLE2 英文名稱: ANKLE2蛋白抗體 0.2ml
ANKMY1 英文名稱: 特異性錨樣蛋白1抗體 0.2ml
ANKRD13B 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體 0.2ml
ANKRD20A1 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體 0.2ml
ANKRD20A3 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體 0.2ml
ANKRD22 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體 0.2ml
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