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研究人員從小鼠胚胎中分別獲取了原代成纖維細(xì)胞和成肝細(xì)胞

閱讀:329發(fā)布時(shí)間:2017-7-18

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒研究人員從小鼠胚胎中分別獲取了原代成纖維細(xì)胞和成肝細(xì)胞。他們將pRL-CMV質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞內(nèi),以檢驗(yàn)轉(zhuǎn)染效率。pRL-CMV來自Promega公司,它在CMV啟動(dòng)子的控制下組成型表達(dá)海腎熒光素酶。因此,利用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)可以確定轉(zhuǎn)染效率。
之后,研究人員又將這種組合應(yīng)用在原代成肝細(xì)胞上。他們發(fā)現(xiàn),盡管轉(zhuǎn)染效率有所提高,但是不如原代成纖維細(xì)胞那么顯著。此外,與單用FuGENE HD相比,試劑組合的使用降低了細(xì)胞活力。為此,他們優(yōu)化了實(shí)驗(yàn),提高了細(xì)胞密度,使得結(jié)果改善。
本研究的一個(gè)目標(biāo)是分離和鑒定MMVD或充血性心臟衰竭循環(huán)系統(tǒng)中的Ex-RNA表達(dá)水平。因?yàn)镸MVD與衰老有關(guān),研究人員還檢查了衰老相關(guān)指標(biāo)。第二個(gè)目標(biāo)是了解與血漿miRNA相比,從Ex-miRNA分離出的miRNA類別,以確定Ex-miRNA與疾病的相關(guān)程度。
研究顯示,轉(zhuǎn)錄激活蛋白結(jié)合靶基因前面的特定DNA序列,與RNA聚合酶形成魔術(shù)貼(Velcro)那樣的相互作用,穩(wěn)定RNA聚合酶與DNA的接觸。轉(zhuǎn)錄激活蛋白與RNA聚合酶的互作可以分為兩個(gè)部分,首先轉(zhuǎn)錄激活蛋白幫助RNA聚合酶結(jié)合DNA雙螺旋,隨后轉(zhuǎn)錄激活蛋白幫助RNA聚合酶解開DNA雙螺旋,起始靶基因的轉(zhuǎn)錄。
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