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elisa試劑盒研究編碼多種翻譯后修飾酶的基因間的相互作用

閱讀:122發(fā)布時(shí)間:2017-1-17

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒Brenda Andrews教授的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行功能基因組研究的一項(xiàng)主要方法——合成基因陣列(SGA)技術(shù),這種方法讓他們能確定基因組的冗余,發(fā)現(xiàn)基因功能和研究基因間相互作用。他們正是通過SGA技術(shù)來制備雙重突變體,進(jìn)行合成致死或合成劑量致死的篩選,用來研究編碼多種翻譯后修飾酶(如激酶和賴氨酸乙酰)的基因間的相互作用。
在這種技術(shù)中他們通過菌落大小,判斷菌株適應(yīng)度的增加和減少,讀出無效、亞效和的等位基因組合。菌落的大小是一種非常適合檢測(cè)的菌株適應(yīng)性特征,他們只需對(duì)生長(zhǎng)中的培養(yǎng)皿拍照,對(duì)單突變體和雙重突變體菌落的大小進(jìn)行比較,從單突變體計(jì)算雙重突變體可能的適應(yīng)度。使用各種計(jì)算和統(tǒng)計(jì)方法來測(cè)量菌落大小,篩選重要信號(hào)通路的相互作用關(guān)系,如那些涉及磷酸化、乙酰化和泛素化的通路。他們的zui終目標(biāo)是通過大規(guī)模的遺傳相互作用分析解開復(fù)雜的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)。
也評(píng)估組合突變(例如雙重和三重突變體),尋找類似過程中基因的干擾對(duì)菌株適應(yīng)度的減少和增加。這種現(xiàn)象叫做基因緩沖。他們首先把菌落培養(yǎng)在豐富培養(yǎng)基上,但是有些基因作用只出現(xiàn)的特定的條件下。為了對(duì)基因緩沖現(xiàn)象進(jìn)行分析,他們?cè)跀?shù)百種不同的條件下重復(fù)試驗(yàn),這樣的話能夠得到基因網(wǎng)絡(luò)作用的豐富數(shù)據(jù)信息。他們正在使用酵母所有的6000個(gè)基因制備雙突變體,以評(píng)估細(xì)胞基因緩沖的整體水平。
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒除了菌落適應(yīng)性以外,他們實(shí)驗(yàn)室還運(yùn)用一些其他的方法來進(jìn)行細(xì)胞信號(hào)過程的研究,比如運(yùn)用合成基因陣列技術(shù)引入亞細(xì)胞標(biāo)記:比如位于核、高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的標(biāo)記。確定酵母細(xì)胞中每一個(gè)基因的突變與亞細(xì)胞形態(tài)的關(guān)系。
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