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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)原理

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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬免疫球蛋白A(IgA)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白A(IgA),再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白A(IgA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中豬免疫球蛋白A(IgA)濃度。
操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
120µg/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60µg/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30µg/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15µg/ml2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5µg/ml1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,然后再加待測(cè)樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒    ,英文名:    PⅢCP ELISA Kit
Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)ELISA試劑盒    ,英文名:    HPCⅢ ELISA Kit
Ⅲ型膠原蛋白(COL Ⅲ)ELISA試劑盒    ,英文名:    COL Ⅲ ELISA Kit
Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒    ,英文名:    Col Ⅲ ELISA Kit
Ⅱ型前膠原羧基端肽(PⅡCP)ELISA試劑盒    ,英文名:    PⅡCP ELISA Kit
Ⅱ型前膠原N端前肽(PⅡNP)ELISA試劑盒    ,英文名:    PⅡNP ELISA Kit
Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒    ,英文名:    HELIX-Ⅱ ELISA Kit
Ⅱ型膠原交聯(lián)C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA試劑盒    ,英文名:    CTX-Ⅱ ELISA Kit
Ⅱ型膠原代謝產(chǎn)物C2C(C2C)ELISA試劑盒    ,英文名:    C2C ELISA Kit
Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA試劑盒    ,英文名:    CTX-Ⅱ ELISA Kit
Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒    ,英文名:    Col Ⅱ ELISA Kit
Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原(KL-6/MUC1)ELISA試劑盒    ,英文名:    KL-6/MUC1 ELISA Kit
Ⅰ型前膠原羧基末端前肽(PⅠCP)ELISA試劑盒    ,英文名:    PⅠCP ELISA Kit
Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒    ,英文名:    PⅠCP ELISA Kit
Ⅰ型前膠原氨基端肽(PⅠNP)ELISA試劑盒    ,英文名:    PⅠNP ELISA Kit
Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒    ,英文名:    PⅠNP ELISA Kit
Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒    ,英文名:    CⅠCP ELISA Kit
Ⅰ型膠原羧基端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒    ,英文名:    ⅠCTP ELISA Kit
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(CTX-I)ELISA試劑盒    ,英文名:    CTX-I ELISA Kit
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒    ,英文名:    ⅠCTP ELISA Kit
Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒    ,英文名:    NTX ELISA Kit
Ⅰ型膠原C端肽(ICTP)ELISA試劑盒    ,英文名:    ICTP ELISA Kit
Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒    ,英文名:    CTX-Ⅰ ELISA Kit
Ⅰ型膠原C 端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒    ,英文名:    CTX-Ⅰ ELISA Kit
Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒    ,英文名:    ColⅠ ELISA Kit
Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒    ,英文名:    Col Ⅰ ELISA Kit
8異前列腺素F2α(8-isoPGF2α)ELISA試劑盒    ,英文名:    8-isoPGF2α ELISA Kit
8異前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)ELISA試劑盒    ,英文名:    8-iso-PGF2a ELISA Kit
8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒    ,英文名:    8-iso-PG ELISA Kit
8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒    ,英文名:    8-epi-PGF2α ELISA Kit
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒

 


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