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技術(shù)文章

胸腎表達(dá)趨化因子elisa試劑盒的操作要求

閱讀:192發(fā)布時(shí)間:2017-3-27

胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK)進(jìn)口elisa試劑盒質(zhì)量要求:
1) 真實(shí)性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過n末端氨基酸序列分析;必要時(shí)應(yīng)用sds-page,rp-hplc和質(zhì)譜(ms)檢測(cè)其真實(shí)性。
2) 純度:應(yīng)用sds-page和rp-hplc方法分析產(chǎn)品純度。
3) 生物活性:進(jìn)行相應(yīng)的體外(invitro)或體內(nèi)(invivo)活性檢測(cè)。
4) 蛋白含量:通過紫外光譜分析,sds-page電泳檢測(cè);必要時(shí)應(yīng)用hplc定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。
5) 內(nèi)毒素:kineticlal法檢測(cè)內(nèi)毒素。
6) 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過濾除菌處理。
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 
8 ng/L 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
4 ng/L 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
2 ng/L 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
1 ng/L 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
0.5 ng/L 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、 
待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后 
再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸 
及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。 
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 
4.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用 
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù) 
5次,拍干。 
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 
7.溫育:操作同3。 
8.洗滌:操作同5。 
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 
15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 
小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)進(jìn)口elisa試劑盒,48T/96T 
大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA Kit,48T/96T 
人*(SS)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠*(SS)ELISA Kit,48T/96T 
豬*(SS)ELISA Kit,48T/96T 
大鼠*(SS)ELISA Kit,48T/96T 
人甲基化酶(Methylase)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA Kit,48T/96T 
大鼠甲基化酶(Methylase)ELISA Kit,48T/96T 
人*(Cyt-C)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠*(Cyt-C)ELISA Kit,48T/96T 
大鼠*(Cyt-C)ELISA Kit,48T/96T 
人血纖蛋白原(Fbg)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA Kit,48T/96T 
大鼠*釋放激素受體抗體(GNRHR-Ab)ELISA Kit,48T/96T 
牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA Kit,48T/96T 
大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA Kit,48T/96T 
小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA Kit,48T/96T  
大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA Kit,48T/96T
馬生長(zhǎng)激素(GH)ELISA Kit,48T/96T 
山羊淋巴細(xì)胞因子進(jìn)口elisa試劑盒,48T/96T  

 


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