| 上海懋康生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 硫酸諾爾斯菌素,D-熒光素,雷帕霉素 |
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主營產(chǎn)品： 硫酸諾爾斯菌素,D-熒光素,雷帕霉素 |
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| 參考價 | 396 |
| 10×100μl | 396元 | 5 套 可售 |
更新時間：2024-05-08 10:23:25瀏覽次數(shù)：518
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Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell
大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品標(biāo)簽：
Rosetta-gami 2(DE3) ；Rosetta-gami B(DE3)；BL21(DE3)；TunerTM；Origami；Rosetta；
產(chǎn)品訂購： 更大包裝或產(chǎn)品技術(shù)問題，請來電/在線咨詢，：
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格（元） |
MF2339-1000UL | Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell | 10×100μl | 396 |
MF2339-5000UL | Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell | 50×100μl | 1696 |
菌株描述
Rosetta-gami 2菌株融合了Rosetta 2和Origami 2兩大菌株的關(guān)鍵特征，不僅增強(qiáng)細(xì)胞質(zhì)中二硫鍵的形成，而且提高含大腸桿菌稀有密碼子的真核蛋白的表達(dá)。
→ pRARE2賦予其Rosetta 2菌的特征，補(bǔ)充大腸桿菌缺乏的7種稀有密碼子（AUA， AGG， AGA，CUA，CCC，GGA和CGG）對應(yīng)的tRNA，位于一共存的氯霉su抗性質(zhì)粒上，由天然啟動子啟動tRNA，提高了外源基因的表達(dá)水平。
→ gor522::Tn10 trxB賦予其Origami 2菌的特征，含突變的硫氧還蛋白還原酶（Thioredoxin Reductase, trxB）和谷胱甘太還原酶（glutathione reductase, gor）基因，明顯改善細(xì)胞質(zhì)內(nèi)二硫鍵的形成，增強(qiáng)蛋白的可溶性。
DE3命名表明該菌株染色體上整合λ噬菌體DE3溶原體（攜帶lacUV5啟動子調(diào)控的T7 RNA聚合酶基因）。這種菌株適用于目的基因克隆在pET載體上的蛋白生產(chǎn)，由IPTG誘導(dǎo)表達(dá)。
Rosetta-gami 2(DE3)菌株具有氯霉su，鏈霉su和四環(huán)素抗性。兼容于具氨芐或卡那霉su抗性的載體。
Rosetta-gami 2(DE3)菌株基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F′[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10 trxB pRARE2 (CamR, StrR, TetR)
產(chǎn)品描述
本品是大腸桿菌Rosetta-gami 2(DE3)菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率＞108 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。
產(chǎn)品包裝
組分名 | 貨號（規(guī)格） | ||
MF2339-1000UL | MF2339-5000UL | ||
MF2339-A | Rosetta-gami 2(DE3) Competent Cell | 10×100μl | 50×100μl |
MF2339-B | Control Vector puC19, 10pg/μl | 10μl | 10μl |
保存與運(yùn)輸條件：
保存：-80℃保存，六個月有效。
運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸。
注意事項(xiàng)
1） 感受態(tài)細(xì)胞必須用干冰運(yùn)輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在-80℃保存，不可反復(fù)凍融且放置時間過長，否則會減低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2） 最好在冰上融化感受態(tài)細(xì)胞，插入冰內(nèi)8min內(nèi)加入目的DNA，不可在冰上放置過長，否則轉(zhuǎn)化效率會降低。
3） 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時，需在相應(yīng)溫度及無菌條件下進(jìn)行。
4） 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?？上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量。
5） 為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可保留部分連接反應(yīng)液以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到最小
6） 產(chǎn)品包裝內(nèi)含載體pUC19 DNA(10pg/μl)，供對照實(shí)驗(yàn)用。
7） 為獲得需要量的蛋白，最佳誘導(dǎo)時間、溫度、IPTG濃度（0.1~2mM）都需進(jìn)行優(yōu)化。
8） Rosetta-gami 2(DE3)菌株攜帶pRARE2質(zhì)粒，除復(fù)蘇培養(yǎng)基無抗生素外，其余所用培養(yǎng)基、培養(yǎng)液均應(yīng)含有34 µg/ml氯霉su，以防質(zhì)粒丟失。
9） 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行】
1） 從-80℃冰箱取出取感受態(tài)細(xì)胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌塊融化，加入目的DNA，用手輕彈管底輕輕混勻（避免用槍吹打），冰浴靜置25min。
2） 42℃水浴熱激45s，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3min。此過程不要搖動離心管。
3） 向每個離心管中加700 μl無菌的2YT或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃ 搖床，200 rpm振蕩培養(yǎng)60min，目的使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá)，使菌體復(fù)蘇。
4） 低速離心收菌（比如5000rpm，1min），留取100μl左右上清，用槍輕輕吹打重懸菌塊，之后加到含34 µg/ml氯霉su和所選質(zhì)粒篩選抗生素的2YT或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于室溫（或37℃）直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16h。
【注意】：
a）涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA總量較多，可不用離心，直接取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；反之，若轉(zhuǎn)化的DNA總量較少，則通過離心（5,000 rpm，1min）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。
b）新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
MF2331-1000UL | BL21 (DE3) Competent Cell 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl |
MF2332-1000UL | BL21 (DE3) pLysS Competent Cell 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl |
MF2333-1000UL | Rosetta (DE3) Competent Cell 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl |
MF2341-1000UL | Rosetta-gami(DE3)pLysS Chemically Competent Cell大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl |
MF2339-1000UL | Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl |
MF2340-1000UL | Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl |
MF2334-1000UL | BL21 Star (DE3) Competent Cell 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl |
MF2335-1000UL | BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl |
MS0021-10G | Chloramphenicol, USP Grade 氯霉su. | 10g |
MS0018-10G | Ampicillin, Sodium Salt 氨芐青霉su鈉 | 10g |
MS0017-5G | Carbenicillin, Disodium Salt 羧芐青霉su二鈉鹽 | 5g |
MS0019-10G | Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉su | 10g |
MS0014-1G | Rifampicin, USP Grade 力福平 | 1g |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞表達(dá)分析
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