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ELISA試劑盒繪制人類胚胎

閱讀:333發(fā)布時間:2016-4-12

     近日出了完整的人類植入前胚胎和胚胎干細胞的轉(zhuǎn)錄組圖譜,這一成果是采用了*的單細胞 RNA-Seq 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)完成的。由一個細胞轉(zhuǎn)錄出來的所有rna稱之為轉(zhuǎn)錄組,其中包括編碼蛋白的 RNA 和非編碼 RNA。對轉(zhuǎn)錄組進行準確分析將有助于全面深入理解細胞中基因表達調(diào)控的分子機制。轉(zhuǎn)錄組分析通常需要幾萬到幾十萬個細胞,然而受人類早期胚胎標本的特殊性及來源的限制,人類對自身胚胎的認識及發(fā)育機制的了解極其有限,ELISA試劑盒由單細胞 rna-seq 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)為深入探討人類胚胎發(fā)育的奧秘提供了新的技術(shù)路線。利用該測序技術(shù)對處于不同發(fā)育階段的早期胚胎的90個單細胞以及人類胚胎干細胞系(hESCs)的 34 個單細胞進行了詳盡的分析,構(gòu)建了世界上zui完整的人類胚胎發(fā)育基因表達圖譜,檢測出了 22,687 個母源表達基因,其中包括 8,701 條長鏈非編碼 RNAs(long noncoding RNAs, lncRNAs),相比于以往通過 cDNA 微陣列檢測出的 9,735 個母源基因數(shù)量大大增加。ELISA試劑盒
在上成功地分離了囊胚階段胚胎中的三種細胞(上胚層細胞、原始內(nèi)胚層細胞、以及滋養(yǎng)外胚層細胞),并進一步分析其基因表達情況,發(fā)現(xiàn)了一批新的細胞分化相關(guān)的標志基因。還將單細胞 RNA-Seq 高通量測序技術(shù)與 RNA 從頭組裝生物信息學分析技術(shù)相結(jié)合,從人類植入前胚胎中發(fā)現(xiàn)了兩千七百多種全新的lncRNA,其中許多l(xiāng)ncRNA表達具有發(fā)育階段特異性,很可能參與了植入前胚胎發(fā)育過程中的細胞命運決定。此外,他們還檢測了建系過程中zui早階段(第0代)的人類胚胎干細胞的轉(zhuǎn)錄組,解答了人類囊胚中的上胚層(epiblast)細胞和體外培養(yǎng)的人類胚胎干細胞之間的基因表達模式是否相同這一由來已久的問題,ELISA試劑盒證實囊胚中的上胚層細胞和建系過程中zui早期的人類胚胎干細胞具有顯著不同的轉(zhuǎn)錄組,其中有一千四百多個基因顯示差異性表達。
采用的單細胞轉(zhuǎn)錄組分析技術(shù)與上比較流行的已經(jīng)有商業(yè)化試劑盒的 Smart-Seq 單細胞轉(zhuǎn)錄組分析技術(shù)進行了系統(tǒng)的比較,發(fā)現(xiàn)本研究組采用的技術(shù)在靈敏度、技術(shù)穩(wěn)定性、以及 cDNA 的全長覆蓋均勻度等方面均明顯優(yōu)于 Smart-Seq 技術(shù)。
 
這項研究工作為研究者們提供了一個全面的人類早期胚胎和胚胎干細胞轉(zhuǎn)錄組表達網(wǎng)絡(luò),對于胚胎發(fā)育機制的深入研究、胚胎干細胞的認識、人類輔助生殖技術(shù)的安全性評估與改善,以及遺傳性疾病的預測將具有重要的意義及深遠的影響。
 
北京大學生物動態(tài)光學成像中心湯富酬研究員、李瑞強研究員及北京大學第三醫(yī)院的喬杰教授是該論文的共同通訊作者,閆麗盈博士和在讀研究生楊明玉是這篇論文的并列*作者。該項研究得到了國家重大科學研究計劃和國家自然科學基金的支持。
 Myoglobin    肌紅蛋白抗體
MSH6    錯配修復蛋白6抗體
Mammaglobin B    乳腺珠蛋白2抗體
MEI-1    減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體
MTCH1    細胞增殖誘導蛋白60(早老素相關(guān)蛋白)
MTCH2    線粒體載體同源蛋白2抗體
MTFR1    線粒體裂變調(diào)節(jié)蛋白1抗體
MTP18    線粒體蛋白18抗體
MICS1    生長激素誘導跨膜蛋白抗體(乳頭源性蛋白2)
MFF    線粒體裂變因子MFF抗體
Mouse serum albumin    小鼠血清白蛋白抗體
MC4 Receptor    黑素皮質(zhì)素4受體抗體
MC5 Receptor    黑素皮質(zhì)素受體5抗體
MOT8    甲狀腺激素轉(zhuǎn)運蛋白/單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白7/8抗體
MARK2    */*蛋白激酶MARK2抗體

ELISA試劑盒


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