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閱讀:454發(fā)布時間:2015-11-16
由于不同的血清間及同一的不同批次的血清間所含因子的質(zhì)量和數(shù)量差異大,因此影響細胞培養(yǎng)的可重復(fù)性,制約動物細胞規(guī)?;囵B(yǎng)。很多研究人員為了保證同一實驗的一致性,不得不購買和儲存大量同一批次的經(jīng)篩選后確定為的血清。這一問題也使得比較不同研究者的實驗數(shù)據(jù)極為困難。 elisa試劑盒
血清中蛋白含量大且成分復(fù)雜,使得實驗和的標準化困難,使疫苗、單克隆抗體及生物活性蛋白等用培養(yǎng)細胞的生物產(chǎn)品的下游分離和純化更復(fù)雜。干細胞培養(yǎng)要求在促進細胞增殖的同時,又要保持細胞的發(fā)育特性,不發(fā)生分化,對培養(yǎng)基組分的要求更加苛刻。使用血清可能改變細胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),可能促進某種細胞生長的同時,抑制另一類細胞生長。在培養(yǎng)原代細胞時使用含血清的培養(yǎng)基可能不能阻止成纖維細胞過度增殖,而影響原代細胞的生長。 雖然血清含有促進細胞生長的成分,但同時含有內(nèi)毒素、血色素、補體、抗體等其他有害成分,影響細胞生長甚至導(dǎo)致細胞死亡,需要大量測試工作才知道對細胞生長的凈作用。低質(zhì)量的血清常被病毒、真菌和支原體等微生物感染。 此外,血清來源不穩(wěn)定,可能受來源地區(qū)環(huán)境及牛群疾病影響發(fā)生供應(yīng)緊張,造成價格上的波動。另外,血清使用不方便。
胎牛血清的收集過程遭到倫理學(xué)的質(zhì)疑。懷孕母牛在屠宰前腹部被刨開,取出胎牛。在無菌條件下,刺破胎牛的心臟或頸動脈/臍帶靜脈以獲取血清,給胎牛造成痛苦。更符合人道的無血清培養(yǎng)基應(yīng)該得到支持。 要實現(xiàn)細胞培養(yǎng)標準化,不要在細胞培養(yǎng)過程中使用血清。無血清培養(yǎng)基是不含動物血清或其他生物提取液,但仍可以維持細胞在體外較長時間生長、繁殖的一種培養(yǎng)基。無血清培養(yǎng)基的研究有兩個方向:一是培養(yǎng)基中不含有任何動物來源的添加組分;二是培養(yǎng)基中不含有不明確的添加組分。當前應(yīng)用較多的無血清培養(yǎng)基歸納為以下四種: elisa試劑盒
1. 一般意義上的無血清培養(yǎng)基:用各類可代替血清功能的生物材料配制細胞培養(yǎng)基,如牛血清白蛋白(BSA)、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素等生物大分子物質(zhì),以及從血清中提取的去除蛋白質(zhì)的混合脂類以及水解蛋白等。其特點是培養(yǎng)基中的蛋白含量較高,添加物質(zhì)的化學(xué)成分不明確,其中含有大量的動物來源蛋白。
2. 無動物來源培養(yǎng)基:許多無動物來源培養(yǎng)基是基于重組藥物安全的考慮,培養(yǎng)基中的添加組分無動物來源,需要的蛋白來源于重組蛋白或者蛋白水解物,這些組分可以保障細胞生長及增殖的需要。 elisa試劑盒
3. 無動物蛋白培養(yǎng)基:培養(yǎng)基*不用動物來源的蛋白,但仍有部分添加物是來源于植物蛋白的水解片段或合成多肽片段等其他衍生物。此類培養(yǎng)基組分相對穩(wěn)定,但必須添加類固醇激素和脂類前體,并且對培養(yǎng)的細胞是高度特異性的。
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