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技術(shù)文章

使用ELISA試劑盒需步步謹(jǐn)慎

閱讀:148發(fā)布時間:2015-8-31

今天我們將對新品試劑盒的操作技術(shù)做出的總結(jié)分享給大家。ELISA檢測模式包括雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法。其中競爭抑制法因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制,其中,使用ELISA試劑盒需步步謹(jǐn)慎。

試劑盒本身的靈敏度和對某一具體樣本的檢測限是不一樣的。靈敏度是針對“檢測方法"而言的,指應(yīng)用該法能檢出待測物的zui低量。定量ELISA試劑盒本身的靈敏度通??梢岳斫鉃樵噭┖袠?biāo)準(zhǔn)品中除“0"標(biāo)準(zhǔn)品外,濃度zui小的標(biāo)準(zhǔn)品濃度值或建立標(biāo)準(zhǔn)曲線時所對應(yīng)的zui低標(biāo)準(zhǔn)品濃度。

其理論定義為;在ELISA中,可用測“0"標(biāo)準(zhǔn)管的光密度值來確定。測定10個或10個以上“0"標(biāo)準(zhǔn)管,求出光密度值的平均值X,再減去兩倍標(biāo)準(zhǔn)差(SD),從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出對應(yīng)于光密度值為X-2SD的濃度,即為靈敏度。ELISA試劑盒

 檢測限是針對“樣本"而言的,通常指試劑盒產(chǎn)品測定實際樣本的zui小檢出量。其理論定義為:按照合理的前處理方法對20份陰性(空白)樣本進行測定,算出平均值X和標(biāo)準(zhǔn)差(SD),據(jù)公式X+3SD得出的結(jié)果即為該樣本的檢測(下)限。其數(shù)值大小與樣本種類、采樣地區(qū)和樣本的前處理方法密切相關(guān)。檢測限可作為評價ELISA試劑盒性能的一個指標(biāo)。

對試劑盒產(chǎn)品而言并不是靈敏度越高,檢測限越低越好。針對某一具體藥物和具體樣本來說,理想的狀態(tài)是檢測范圍的中間值與該藥物在某一樣本的"超標(biāo)值“或"陽性值“接近。這樣既可以減少誤差又方便客戶使用。ELISA試劑盒


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