ELISA試劑盒單克隆抗體制備時很多朋友會遇到這樣的問題，即我們免疫用的蛋白為原核表達(dá)蛋白而目的蛋白是真核蛋白或病毒等，因?yàn)闆]有標(biāo)準(zhǔn)品我們做出來的抗體沒有辦法用標(biāo)準(zhǔn)品來驗(yàn)證是否與其發(fā)生反應(yīng)，zui終導(dǎo)致我們做出的是無用抗體。以下內(nèi)容為我公司實(shí)驗(yàn)室技術(shù)總結(jié)的幾種方法供大家參考，希望對大家有所幫助。
一、若要檢測的抗原為某種新的病毒
ELISA試劑盒方法：1、大量做出該病毒某個蛋白的單克隆抗體；
2、大量采集該病毒疑似感染動物或人血液，用PCR的方法進(jìn)一步確定每份血液是否真的有該病毒存在；
3、將你做出的大量抗體中的一個做標(biāo)記作為標(biāo)記抗體，其他所有抗體作為包被抗體，檢測第二步中確定陽性的血清，結(jié)果與陰性血清做對比，并畫出點(diǎn)狀分布圖。若陽性血清大部分的點(diǎn)在陰性血清之上恭喜你找到配對抗體了；若結(jié)果相差不大，請重新標(biāo)記一株抗體做相同實(shí)驗(yàn)。
二、若要檢測抗原為某一細(xì)胞因子
ELISA試劑盒方法：1、通過超表達(dá)的方法建立穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系，注意要在目的蛋白上加相應(yīng)的標(biāo)簽，以便純化。若僅僅是找到配對抗體則不需要純化甚至不需要建立穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系瞬時轉(zhuǎn)染就可實(shí)現(xiàn)，若要進(jìn)一步作出標(biāo)準(zhǔn)曲線請純化。
2、 將細(xì)胞系建立后，我們就可以拿到標(biāo)準(zhǔn)品了，做配對工作就相應(yīng)簡單。
3、若該種細(xì)胞因子可有某種陽性刺激物大量刺激而來，也可不做細(xì)胞系。用陽性刺激物刺激，我們細(xì)胞刺激物的上清液來做標(biāo)準(zhǔn)品也可。
phospho-E2F1 (Thr433) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體
ESE1 上皮細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子1抗體
Endothelin 2 內(nèi)皮素2抗體
EPHB3/Eph receptor B3 內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白*激酶B3抗體
EVC1 軟骨外胚層發(fā)育不良相關(guān)蛋白抗體
EVA1 髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體
Estrogen receptor alpha 雌激素受體α抗體
ERN2 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白2抗體
ZN521 鋅指蛋白521抗體
E.coli O6 大腸桿菌埃希桿菌O6抗體（腸致病性大腸桿菌O6）
EXPB-2 植物延展素-β
ET-1 內(nèi)皮素-1抗體
ERK4 絲裂原活化蛋白激酶4抗體
ELISA試劑盒
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