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技術(shù)文章

ELISA檢測試劑盒的準(zhǔn)確操作步驟

閱讀:381發(fā)布時間:2016-6-13

  面對市場上種類越來越多的ELISA檢測試劑盒,人elisa試劑盒、小鼠elisa試劑盒、豬elisa試劑盒、羊ELISA試劑盒等,再選擇的時候我們就有些眼花繚亂了。雖然每個ELISA試劑盒價格都不貴,但是如果使用不恰當(dāng)?shù)脑?,造成檢測結(jié)果出差錯還是不好的。所以在使用ELISA檢測試劑盒做檢測的時候,步驟的準(zhǔn)確性真的是相當(dāng)重要的。以下先介紹一種簡單的—間接法:
  
  1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃;
  
  2.次日洗滌3次;
  
  3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;
  
  4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;
  
  5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;
  
  6.zui后一遍用DDW洗滌。
  
  7.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  
  8.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
  
  9.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
  
  如果按照以上的步驟用于ELISA檢測試劑盒檢測的話,那么不論購買的國產(chǎn)ELISA試劑盒還是進口ELISA試劑盒的話,那么檢測結(jié)果的準(zhǔn)確率都不低的。
  
  DR1protein轉(zhuǎn)錄下調(diào)蛋白1抗體
  
  DHRS2脫氫酶/還原酶家族成員2抗體
  
  DSPP牙本質(zhì)磷蛋白抗體
  
  DermokinebetaDermokineβ蛋白抗體
  
  DPCR1DPCR1蛋白抗體
  
  DERP6表皮源性蛋白6抗體
  
  DUSP7雙特異性蛋白磷酸酶7抗體
  
  DUSP26雙特異性蛋白磷酸酶26抗體(絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶8)
  
  DAO1阿米洛利結(jié)合蛋白1抗體
  
  DBF4AS期激酶活化蛋白DBF4A抗體
  
  DSN1著絲粒相關(guān)蛋白DSN1抗體
  
  DCDC2雙皮層蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白DCDC2抗體
  
  DAGLA神經(jīng)干細胞樹突調(diào)節(jié)蛋白DAGLα抗體
  
  DOK4對接蛋白4抗體
  
  DULLARDDULLARD蛋白抗體
  
  DYRK1A*/*蛋白激酶MNB抗體
  
  ELISA試劑盒

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