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菌種保存的幾種方法

閱讀:552發(fā)布時(shí)間:2016-6-3

基本原理: 
    微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過(guò)程中,必須使微生物的代謝處于zui不活躍或相對(duì)靜止的狀態(tài),才能在一定的時(shí)間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。ELISA試劑盒

    低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據(jù)這三個(gè)因素而設(shè)計(jì)的。

保藏方法大致可分為以下幾種:

1.傳代培養(yǎng)保藏法

   又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細(xì)菌用),培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存。

2.液體石蠟覆蓋保藏法
   是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。

3.冷凍保藏法
    可分低溫冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。

4.冷凍干燥保藏法
    先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。

    有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。

5.載體保藏法
    是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。

6.寄主保藏法
    用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。

Endomucin    內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體
Epac1    *調(diào)節(jié)*核苷酸交換因子1抗體
phospho-E2F1 (Thr433)    磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體
ESE1    上皮細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子1抗體
Endothelin 2    內(nèi)皮素2抗體
EPHB3/Eph receptor B3    內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白*激酶B3抗體
EVC1    軟骨外胚層發(fā)育不良相關(guān)蛋白抗體
EVA1    髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體
Estrogen receptor alpha    雌激素受體α抗體
ERN2    內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白2抗體
ZN521    鋅指蛋白521抗體

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