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技術(shù)文章

如何判定ELISA試劑盒試劑的要求

閱讀:233發(fā)布時(shí)間:2016-4-20

    ELISA試劑盒方面一:檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對(duì)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。

方面二:使用校對(duì)過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。

方面三:仔細(xì)閱讀說(shuō)明書嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)。

方面四:洗滌*

    洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性。

方面五:嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間

    反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng),酶失活;反應(yīng)時(shí)間過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。

方面六

    注意ELISA試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。

方面七:評(píng)估試劑的實(shí)用性

    試劑的穩(wěn)定與否,對(duì)準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽(yáng)對(duì)照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn)。

    顯色時(shí)間過短,加入終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過少,易ELISA試劑盒出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時(shí)間后顯色,應(yīng)判為假陽(yáng)性,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,不可報(bào)陽(yáng)性,這可能是本底顯色的結(jié)果。

方面九:加樣要準(zhǔn)確、快速

    如果加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測(cè)定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在一定時(shí)間內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗(yàn),如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,而且ELISA試劑盒試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露在外,尤其室溫過高時(shí),保存期會(huì)縮短甚至失效。

A1BG    α1B糖蛋白抗體
A1CF    載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體
AIFM3    凋亡誘導(dǎo)因子3抗體
Apaf1 Interacting Protein    凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體
APPD    凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體
Acid sphingomyelinase    酸性神經(jīng)鞘磷脂酶抗體
ANT-1    腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體
ALS2CR8    肌萎縮側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體
ATP6IP2    ATP酶H+轉(zhuǎn)運(yùn)溶酶體輔助蛋白2抗體
Azurocidin    肝素結(jié)合蛋白/陽(yáng)離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體
Alpha-Synuclein    核突觸蛋白抗體
beta-Actin (Loading Control)    β-肌動(dòng)蛋白/β-Actin 抗體(內(nèi)參抗體)
beta-Amyloid 1-42 (CT)    β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體
beta Amyloid 1-16    β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體
beta Amyloid 1-28    β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體

ELISA試劑盒

 


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