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冰凍組織切片的免疫熒光雙染

閱讀：510發(fā)布時間：2016-1-11

冰凍組織切片的免疫熒光雙染elisa試劑盒

（1）選取一抗時要來源于兩種不同的動物，我用的是來源于rabbit和rat的抗體，二抗則是不同熒光信號標(biāo)記的，我用的是donkey anti-rabbit-FITC（綠）和donkey anti-rat-Tex-Red（紅）。

（2）我的做法是兩種一抗同時孵育，然后兩種二抗同時孵育。抗體濃度、孵育時間要仔細(xì)摸索，我感覺一抗4度孵育過夜比較好，背景比較清晰。

（3）我的陽性對照用的是陽性組織切片，陰性對照則分別是家兔和大鼠的IgG，熒光標(biāo)記物對照是PBS+熒光標(biāo)記物。elisa試劑盒

（4）封閉血清與二抗來源動物一致，我用的是10%的正常donkey血清。

（5）其余步驟同一般免疫熒光單標(biāo)操作。


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