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人軸抑制蛋白2(Axin-2)CLIA試劑盒操作步驟說(shuō)明

閱讀:374發(fā)布時(shí)間:2019-10-10

                 人軸抑制蛋白2(Axin-2)CLIA試劑盒操作步驟說(shuō)明

秋天。山谷里到處是黃黃的顏色,黃的谷子,黃的樹(shù)葉。天高高的,遠(yuǎn)遠(yuǎn)的,云淡淡的,輕輕的,田野里彌漫著熟了的谷粒的甜味。農(nóng)人忙著收割,一塊一塊的田野空蕩下來(lái),一擔(dān)一擔(dān)的谷子挑回來(lái)。這個(gè)美麗的秋天就是一位穿著金色衣裙的仙女她那輕飄的衣袖拂去了太陽(yáng)的焦熱,將明亮和清爽撒給大地;她用寬大的衣裳擋著風(fēng)寒,卻捧起沉甸甸的果實(shí)奉獻(xiàn)人間。人們都愛(ài)秋天,愛(ài)她的天高氣爽,愛(ài)她的云淡日麗,愛(ài)她的香飄四野。秋天使大家的笑容格外燦爛。接下來(lái)介紹人軸抑制蛋白2(Axin-2)CLIA試劑盒操作步驟說(shuō)明

操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

 


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