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小鼠elisa試劑盒間接法提高陽性值的辦法

閱讀:1126          發(fā)布時間:2018-5-25

小鼠elisa試劑盒中的酶標二抗和顯色液做,陽性值卻很高OD 1.4,這樣看來我的抗原應(yīng)該沒問題,好像問題出在酶標二抗上,根據(jù)客戶留言在網(wǎng)上問題解答如下:

    先要確定兩種酶標二抗使用的是不是同一批包被的板,因為雖然是相同的抗原,可能兩次包被不一樣。

    如果是同一批板,出現(xiàn)這種情況只能說明你的酶標二抗失活了,買新的二抗,按說明書上的稀釋倍數(shù)稀釋;陰性對照有顏色很可能是沒封閉好。陽性值是由你的抗原抗體間親和力決定的,增加抗原抗體用量,或提高二抗?jié)舛?,但靈敏度可能會降低,你可以重新摸下工作濃度;

    陰性值降低,你可以采用BSA封閉2小時看看,好像沒聽說有人用FCS封閉的,你可以嘗試采用其他的封閉液,據(jù)我了解,用BSA封閉不是很好,可以試試脫脂奶粉;再就是TMB本身時間長了就會略顯色,你可以調(diào)整顯色時間。

Elisa試劑盒說明:

1.檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法

2.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。

3.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。

4.小鼠elisa試劑盒中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。

5.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。

 生物素化CD14IgG 人P27蛋白(P27)

 生物素化CD20IgG 人OJ/抗異亮氨酰tRNA合成酶(OJ/IleRS) 

 生物素化CD4IgG 人N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)

 生物素化C-反應(yīng)蛋白IgG 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)

 生物素化癌胚抗原IgG 人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad) 

 生物素化促甲狀腺素IgG 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)

 生物素化瓜氨酸環(huán)肽 人N端外顯肽(Ext-N)

 生物素化腦鈉肽 人N端前腦鈉素(NT-proBNP)
小鼠elisa試劑盒

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