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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
閱讀:932 發(fā)布時(shí)間:2016-9-22ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠卵清蛋白特異性IgE (OVA sIgE)水平。用純化的抗OVA sIgE抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入卵清蛋白特異性IgE,再與HRP標(biāo)記的OVA sIgE抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的卵清蛋白特異性IgE (OVA sIgE呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠卵清蛋白特異性IgE (OVA sIgE)的含量。