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血清低密度脂蛋白試劑盒說明書

閱讀:486          發(fā)布時間:2022-12-16
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血清低密度脂蛋白(Low density lipoprotein cholesterol , LDL-C)試劑盒說明書

分光光度法50管/48樣

注意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義

低密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,與冠心病的發(fā)生和動脈粥樣硬化損傷呈正相關(guān),是脂類疾病分類和風(fēng)險預(yù)測的一個重要指標(biāo)。

測定原理

用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白膽gu醇,利用酯酶催化膽gu醇酯水解生成游離膽gu醇和游離脂肪酸,從而把膽gu醇酯轉(zhuǎn)化為FC;進(jìn)一步利用膽gu醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。

需自備的儀器和用品

離心機,恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。

試劑組成和配制

試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體40mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加15mL試劑四充分溶解。

試劑四:液體20mL×1瓶,4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,4℃保存。

樣品處理

取血后3小時內(nèi)分離血清,將血清樣品與試劑一按照2:1的比例充分混勻,25℃靜置15min,2000g離心15min,上清置于冰上待測。

測定操作表

空白管標(biāo)準(zhǔn)管測定管

蒸餾水(μL)20

標(biāo)準(zhǔn)品(μL)20

樣本(μL)20

試劑二(μL)750750750

試劑三(μL)250250250

混勻,37℃靜置30min,于1mL玻璃比色皿,空白管調(diào)零,測定500nm處吸光值A(chǔ)。分別記為A標(biāo)準(zhǔn)管和A測定管

計算公式

LDL-C含量(mmol/L)= A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管×C標(biāo)準(zhǔn)管

                     =5×A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管

C標(biāo)準(zhǔn)管:5mmol/L

注意事項

1.樣本切勿反復(fù)凍融,最好在取血后12小時內(nèi)完成測定。

2.配置好的試劑三4℃保存可半個月。

3.線性范圍為0.17mmol/L- 4.2mmol/L。


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