技術(shù)文章
PrimaCell™大鼠肝星狀細(xì)胞試劑盒操作要點(diǎn)
閱讀:561 發(fā)布時間:2022-9-8PrimaCell™大鼠肝星狀細(xì)胞試劑盒操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
輔酶ⅡNADP(H)含量試劑盒
NAD激酶(NADK)試劑盒
NADP磷酸酶(NADPase)測試盒
6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)試劑盒
胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)試劑盒
蘋果酸酶(ME)試劑盒
6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶(6PGDH)試劑盒
硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)試劑盒
硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)試劑盒
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性測定試劑盒
過氧化氫(H2O2)試劑盒
丙二醛(MDA)試劑盒
丙二醛(MDA)試劑盒
超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒
過氧化氫酶(CAT)試劑盒
過氧化物酶(POD)試劑盒