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技術(shù)文章

炮姜LAMP鑒定試劑盒使用方法

閱讀:520          發(fā)布時間:2022-8-30

炮姜LAMP鑒定試劑盒使用方法:

一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。


1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。


2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。


3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。


4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。


5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。


6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。


二、樣品 DNA 的制備


7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。


8. 如果有 N 個樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。


三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)


9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照(用第一步稀釋得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線系列稀釋液的第 4 號做模板)。

血管緊張素原抗體

雄激素受體抗體

細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑)

軸蛋白1抗體

自噬相關(guān)蛋白9B抗體

自噬相關(guān)蛋白12抗體

自噬相關(guān)蛋白13抗體

自噬相關(guān)蛋白3抗體

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體

去整合素樣金屬蛋白酶18抗體

活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體

銜接蛋白β抗體

銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體

水通道蛋白-9抗體

膜粘連蛋白A3抗體

膜粘連蛋白 A4抗體

自噬相關(guān)蛋白8A抗體


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