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技術(shù)文章

轉(zhuǎn)基因植物CamV35S啟動(dòng)子核酸檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣

閱讀:628          發(fā)布時(shí)間:2021-10-13

轉(zhuǎn)基因植物CamV35S啟動(dòng)子核酸檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣:

雙重核酸試劑盒(熒光PCR法) 1.  收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè), 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。

2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。

3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。

4.  洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)

檢測(cè)程序:

1.  加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板:同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ,置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

性能:

1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。

2. 靈敏度:檢測(cè)濃度小于0.1 U/mL。

3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

6. 有效期:6個(gè)月

磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半胱氨酸和絲氨酸富含核蛋白1)

有絲分裂激酶A/B/C抗體

蛋白酪氨酸激酶ATK抗體

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膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體

磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

磷酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體

磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體

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磷酸化腎上腺素能受體β2抗體

APS抗體

激活素受體樣激酶1抗體

激活素A受體1B抗體

磷酸化雄激素受體抗體

磷酸化A-Raf抗體

?;拾贝济擋C?抗體

脂肪細(xì)胞特異性粘附分子抗體

腺相關(guān)病毒5抗體

腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗體

腺苷單磷酸活化蛋白激酶β2抗體

磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體

細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體


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