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多聚甲醛固定微生物樣品原理闡述
閱讀:3382 發(fā)布時間:2021-6-22多聚甲醛固定微生物樣品原理:形成分子間的交聯(lián),影響蛋白構(gòu)型而使之固定。 優(yōu)點(diǎn):形態(tài)結(jié)構(gòu)保存好,且穿透性強(qiáng),組織收縮少。
缺點(diǎn):
甲醛放置過久可氧化為甲酸,使溶液pH降低,影響染色;
醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙;
分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或*掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露??稍斐杉訇幮缘娜旧Y(jié)果。 注意事項(xiàng):
縮短固定時間,降低固定溫度(4°C),為此組織塊不宜過厚。
改用中性緩沖福爾馬林,以pH值7.2~7.4 0.01mol/L的磷酸鹽緩沖液配制成10%甲醛固定液,減少固定液pH的變化。
固定后充分水洗以減少分子間交聯(lián)。
切片在作免疫組化染色前,先經(jīng)預(yù)處理使抗原再現(xiàn)(抗原修復(fù))。