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其他elisa試劑盒的陰性對(duì)照酶

閱讀:769          發(fā)布時(shí)間:2018-3-8

其他elisa試劑盒解決方案便是酶標(biāo)板上包被二抗,每個(gè)孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子,然后加樣品,再加不帶標(biāo)志的檢測(cè)抗體,顯色底物。樣品的目標(biāo)小分子的含量越高,吸光度越低。
有些客戶會(huì)用OVA(卵清卵白)做一些哮喘,ELISA試劑盒過敏性腸炎的模型,然后會(huì)檢測(cè)粘膜特異性的sIgA以及血清內(nèi)里IgG,IgE等指標(biāo)。當(dāng)客戶向我咨詢購置這幾個(gè)指標(biāo)的試劑盒的時(shí)候,我很肯定地說這些指標(biāo)的檢測(cè)要你自己特制,不會(huì)有商品化的試劑盒出售的。當(dāng)你baidu一下時(shí),頁面出來大量的商品化的試劑盒,千篇一律的明書時(shí)候,我真的是蒙了,我懷疑自己跟不上時(shí)代了。我不去評(píng)論這些試劑盒的真假,我仍舊建議做這些檢測(cè)指標(biāo)的朋友,
方法一:用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“ "、“-"號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的2.1倍,即為陽性。
方法二:用于檢測(cè)未知抗體的間接法:用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,其他elisa試劑盒加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
含量測(cè)定    50mg     100072-200402    鹽酸克侖特羅
檢查用    100mg    100075-197902    熒光母素
含量測(cè)定     100mg     100076- 200703     左炔諾孕酮
檢查用    50mg    0082-9701    葡萄糖酸鈣
含量測(cè)定    50mg    100084-200101    酒石酸美托洛爾
含量測(cè)定    50mg         氟哌利多
含量測(cè)定    50mg    100089-200301    雙羥萘酸噻嘧啶
含量測(cè)定    50mg    100090-200301    雙羥萘酸
含量測(cè)定    100mg    100091-199601    酚酞
熔點(diǎn)對(duì)照品    1g    100093-200804    香草醛(熔點(diǎn)℃)
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