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技術(shù)文章

大鼠elisa試劑盒之DIY夾心法技術(shù)方針

閱讀:794          發(fā)布時(shí)間:2017-10-19

大鼠elisa試劑盒選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì);若選擇兩個(gè)單抗,必須識(shí)別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對(duì)。
一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的線(xiàn)性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類(lèi)試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
 
標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,瞬時(shí)離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說(shuō)明書(shū)中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
 
ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí),應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說(shuō)明書(shū)常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。

 
 為了優(yōu)化靈敏度,建議過(guò)夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性。
當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí),如血清,大鼠elisa試劑盒建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。
BOC-L-酪氨酸甲酯    25克        進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
BOC-L-酪氨酸    10克    RT    *
BOC-L-谷氨酰胺    25克        進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
BOC-L-谷氨酸    100克        *
BOC-L-高苯丙氨酸    100克        進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
BOC-L-丙氨酸    500克        *
BOC-L-丙氨醇    5克    RT    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
BOC-L-苯甘氨酸    100克        進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
BOC-L-苯丙氨酸    10克    RT    *
BOC-L-苯丙氨醇    100克        *
BOC-D-纈氨酸    25克        *
大鼠elisa試劑盒

 

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