腫瘤是基因組疾病，故單一基因檢測難以滿足指導(dǎo)個體化治療的需要。近期多項研究利用二代測序技術(shù)分析了血漿游離DNA基因組、外顯子組改變與治療療效的關(guān)系。循環(huán)腫瘤細胞是有關(guān)外周血分子標(biāo)志物研究的另一焦點。其作為完整的、無損傷的腫瘤細胞，能反映腫瘤的轉(zhuǎn)移、耐藥、進展等過程。elisa試劑盒
在該研究中，研究人員比較了循環(huán)腫瘤細胞中基于血液KRAS突變分析和循環(huán)血漿DNA用于預(yù)測肺癌原發(fā)性腫瘤突變這兩種方法來替代組織活檢的可行性。
研究人員通過利用cobas4800(羅氏)等位基因特異性PCR技術(shù)檢測肺癌患者KRAS突變狀態(tài)，該技術(shù)的原理是在基因組的某些非編碼區(qū)，一些短的序列可重復(fù)多次，并按照孟德爾遺傳法則呈共顯性遺傳。這種等位基因的多態(tài)性常達十個以上，因此這種遺傳標(biāo)記帶有很大的信息量。除了等位基因的遺傳多態(tài)性分析外，還應(yīng)用于點突變的檢測。
通常只需采集病人9ml血標(biāo)本就可以檢測，利用ScreenCell MB裝置捕獲循環(huán)腫瘤細胞，DNA通過人類組織和細胞*從循環(huán)腫瘤細胞中提取出。通過自定義設(shè)計的高分辨率溶解法檢測KRAS基因突變，并通過QIAGEN試劑盒進行焦磷酸測序。elisa試劑盒
91例接受肺癌切除手術(shù)患者中，通過福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)進行組織活檢的18例，通過外周血游離DNA檢測的17例，循環(huán)腫瘤細胞檢測的47例。研究發(fā)現(xiàn)，以血液為基礎(chǔ)檢測KRAS突變試驗中，外周血游離DNA檢測的敏感度和特異度分別為81%、97%;循環(huán)腫瘤細胞檢測的敏感度和特異度分別為86%、38%。
該研究結(jié)果表明，以血液為基礎(chǔ)的突變試驗用于預(yù)測肺癌原發(fā)性腫瘤基因突變是可行的。就腫瘤異質(zhì)性而言，與循環(huán)腫瘤細胞相比，循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)對腫瘤負荷的影響更大，并且更密切說明了腫瘤的突變。elisa試劑盒
