抗原與淋巴細(xì)胞接觸ELISA試劑盒產(chǎn)生免疫反應(yīng)的方式有多種:抗原可先與巨噬細(xì)胞作用，然后再傳遞給淋巴細(xì)胞，也可直接與淋巴細(xì)胞（包括T細(xì)胞和B細(xì)胞）作用，發(fā)生免疫反應(yīng)?？乖镔|(zhì)刺激機(jī)體后，抗體的產(chǎn)生有一定的規(guī)律，即抗原進(jìn)入機(jī)體后，首先經(jīng)過(guò)一段潛伏期，然后抗體含量逐漸增多，達(dá)到高峰后，暫時(shí)維持一定的時(shí)間，以后抗體含量又逐步下降，完成初次反應(yīng)的階段。當(dāng)同樣的抗原第二次再刺激機(jī)體后，抗體含量上升速度比初次反應(yīng)速度快，并且峰值也較前次為高，高峰持續(xù)時(shí)間也較長(zhǎng)，形成再次反應(yīng)階段。
如果在抗體含量為zui高時(shí)，一般情況就能得到價(jià)的抗血清，經(jīng)過(guò)采血，如不注射同樣抗原，機(jī)體產(chǎn)生抗體的能力就會(huì)日漸下降，但是，如果動(dòng)物休息相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間，例如2－3個(gè)月后，再次注射同樣的少量抗原，ELISA試劑盒它的抗體含量會(huì)很快上升，能重新獲得價(jià)抗血清。機(jī)體的特異性免疫反應(yīng)與抗體的形成直接相關(guān)，因此，注意在抗原刺激下影響機(jī)體產(chǎn)生抗體的因素尤為重要。
應(yīng)特別注意選擇合適的動(dòng)物。免疫有物動(dòng)物，年齡、體重和性別均要考慮。作為免疫用的動(dòng)物年齡太小，免疫系統(tǒng)發(fā)育還不健全，會(huì)影響抗體的形成；年齡太大因代謝機(jī)能衰弱，也會(huì)影響抗體的形成。因此，ELISA試劑盒對(duì)于實(shí)驗(yàn)室常用的家兔選擇兔齡為9－24個(gè)月，體重為2－2.5kg,耳朵大，靜脈粗，無(wú)腳癬的健康雄性白兔。挑選合適的注射途徑和部位。抗原進(jìn)入機(jī)體的途徑多種多樣，例如肌肉、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)、靜脈、腳掌和腹腔內(nèi)等。經(jīng)常采用的有兩種途徑：一種肌肉注射，另一種是靜脈注射，如果兩種途徑交替使用，那么應(yīng)先靜脈注射后肌肉注射，這樣有利于機(jī)體產(chǎn)生價(jià)的抗體。 對(duì)于某一途徑，例如，肌肉注射時(shí)，常在不同肌肉部位進(jìn)行多點(diǎn)注射，免疫效果也較好。采用什么途徑注射，與抗原的性質(zhì)有關(guān)，對(duì)于某些病毒例如蕪菁花葉病毒，由于在純化時(shí)加入了許多化學(xué)物質(zhì)就不適宜靜脈注射。另外，為了防止動(dòng)物的注射點(diǎn)發(fā)火，一般每個(gè)注射點(diǎn)的劑量不應(yīng)大于0.5ml.為了使抗原在機(jī)體內(nèi)慢慢釋放出來(lái)，延長(zhǎng)抗原在機(jī)體內(nèi)的停留時(shí)間，從而使產(chǎn)生抗體的初次反應(yīng)和再次反應(yīng)結(jié)合在一起，常常在抗原中加入佐劑，并與抗原充分混合，一起注入動(dòng)物體內(nèi)。
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