zui近在做血清ELISA，重復(fù)了很多次，結(jié)果每次結(jié)果的背景值都很高，OD值達(dá)到0.6，很頭疼，嘗試過用封閉液稀釋抗體和血清，也嘗試過重重拍板拍干，結(jié)果均無濟(jì)于事！希望我司技術(shù)幫忙解決。根據(jù)我們的技術(shù)探討得出以下幾點(diǎn)：
ELISA試劑盒不正確的洗滌：洗滌不充分或漏洗都有會(huì)導(dǎo)致背景高。核對(duì)ELISA洗液的量并確保所有洗滌步驟都完成；確保eBioscience ELISA洗液被用并稀釋正確。讓洗液在孔里至少停留15-30s。
ELISA試劑盒底物被污染： 底物溶液自身是沒有顏色的，確保底物在用之前沒有被金屬離子或氧化試劑污染。
ELISA試劑盒稀釋液被污染：大部分ELISA稀釋液是蛋白基質(zhì)，*次打開后就有可能已經(jīng)被污染了，必須用無菌的移液管從瓶底移取使用。
ELISA試劑盒底物曝光：底物曝光可能會(huì)變藍(lán)，解決辦法就是使用前保存在棕色瓶里。
ELISA試劑盒偶聯(lián)物稀釋有誤：確保偶聯(lián)物稀釋按照說明書的要求，偶聯(lián)物濃度太高有可能導(dǎo)致高背景。
ELISA試劑盒孵育時(shí)間和溫度不對(duì)：孵育時(shí)間和溫度嚴(yán)格按照ELISA操作流程規(guī)定。
小鼠原B細(xì)胞株；BaF3
小鼠腦瘤細(xì)胞；BC3H1
小鼠成肌細(xì)胞；C2C12
小鼠肝癌細(xì)胞；Hepa 1-6 [Hepa1-6]
小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞；P815
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；3T6-Swiss albino
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；C3H 10T1/2 2A6
小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞；DCS
小鼠淋巴瘤細(xì)胞；EL4
小鼠前胃癌細(xì)胞；MFC
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞；RAW 264.7 [RAW264.7
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；3T3-L1
小鼠乳腺癌細(xì)胞；CCC-Ca761-03
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；BALB/C 3T3
小鼠淋巴細(xì)胞白血??；L1210
小鼠肺腺癌細(xì)胞系；LA795
C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞（L929-TK-）；LTK-
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞；SH2
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞；SH3
倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞；145-2C11
小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16
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