ELISA試劑盒間充質(zhì)干細(xì)胞主要來(lái)源于骨髓、脂肪和臍帶等組織。Zuk等從人抽脂術(shù)中抽取的脂肪組織懸液中分離出多潛能細(xì)胞。人脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞和骨髓源間充質(zhì)干細(xì)胞一樣具有分化為脂肪、骨、軟骨、骨骼肌、肝、心肌和神經(jīng)等細(xì)胞的潛能。脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞表面分子及特征與其他組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞相似。Kern等報(bào)道，與骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞相比，脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞具有更長(zhǎng)的培養(yǎng)期以及更高的增殖能力。由于脂肪來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞相對(duì)于骨髓而言更容易獲得，使得其成為間充質(zhì)干細(xì)胞基礎(chǔ)與臨床研究方面的熱
1 材料和方法
設(shè)計(jì)：細(xì)胞學(xué)體外觀察。
ELISA試劑盒 時(shí)間及地點(diǎn)：于2009-08在中國(guó)醫(yī)學(xué)*血液學(xué)研究所泰達(dá)生命科學(xué)技術(shù)研究中心完成。
材料：**脂肪組織來(lái)源于天津怡麗醫(yī)學(xué)美容整形門診接受抽脂術(shù)的5例健康供者，對(duì)治療及實(shí)驗(yàn)均簽署知情同意書。Hela細(xì)胞由中國(guó)醫(yī)學(xué)*基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心提供。
實(shí)驗(yàn)方法：
人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)：分別從每例抽脂健康供者抽取20 mL脂肪組織，先用 0.075%的膠原酶消化30 min，消化后的混合液經(jīng)200目濾網(wǎng)過(guò)濾后接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，加入含體積分?jǐn)?shù)為10%胎牛血清的DF12培養(yǎng)基，于37 ℃、體積分?jǐn)?shù)為5%的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，*消化細(xì)胞，按1∶3傳代。
Hela細(xì)胞的培養(yǎng)：取Hela細(xì)胞，加入含體積分?jǐn)?shù)為10%胎牛血清的1640培養(yǎng)基。于37 ℃、體積分?jǐn)?shù)為5%的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，*消化細(xì)胞，按1∶3傳代。脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的流式表型檢測(cè)：脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD19-FITC ， CD34-FITC ， CD11b-PE，CD73-PE，CD90-PE，CD45-PE， CD105-PE，HLA-DR-PE標(biāo)記后，流式細(xì)胞分析儀進(jìn)行分析。
ELISA試劑盒 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化：復(fù)蘇細(xì)胞后，以2×105/孔的密度接種于24孔板中，待細(xì)胞達(dá)到70%融和后，更換為分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基。成骨分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基：體積分?jǐn)?shù)為10%的胎牛血清、0.1 μmol/L*、0.2 mmol/L抗壞血酸磷酸鹽、10 mmol/L β-甘油磷酸。成脂分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基：體積分?jǐn)?shù)為10%的胎牛血清、 1 μmol/L*、0.5 mmol/L IBMX、10 mg/L 胰島素、100 μmol/L*。每?jī)扇旄鼡Q培養(yǎng)基，21 d后對(duì)成脂誘導(dǎo)的脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行油紅O染色，對(duì)成骨誘導(dǎo)的脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞作Von Kossa染色。
ELISA試劑盒 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞的cDNA制備：*消化、收集人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞和Hela細(xì)胞，按RNA提取試劑盒說(shuō)明書所提供的操作程序提取RNA，并對(duì)所得到的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系為20 μL，其中5×反轉(zhuǎn)錄緩沖液4 μL，RNAsin 1 μL，10 mmol/L dNTP 2 μL，DTT 1 μL， Oligo（dT） 1 μL，細(xì)胞總RNA 5 μg，M-MLV（反轉(zhuǎn)錄酶） 1 μL（200 U），用RNase-free水補(bǔ)充至 20 μL。反應(yīng)條件為42 ℃水浴1 h，然后70 ℃ 水浴10 min以滅活反轉(zhuǎn)錄酶，獲得所需cDNA。用RT-PCR檢測(cè)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞端粒酶基因的表達(dá)：根據(jù)GeneBank里端粒酶的mRNA序列設(shè)計(jì)引物，F(xiàn)orward primer：5’-GGG TGG CAC GGC TTT TGT TCA GAT-3’，Reverse primer：5’-TCA GCC GCA AGA CCC CAA AGA GTT-3’ 。
熊果苷 76
熊果苷
雄諾龍、雙氫睪酮
鋅成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（G02702
鋅成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（G02701
鋅成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（G0270
鋅白銅成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（15-20鋅白銅（G02104
辛硫磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
辛硫磷甲醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)061405
硝基苯系列混標(biāo)/甲醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
蝦青素（需干冰運(yùn)輸01600A
蝦青素
錫精礦成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（G072 2
錫精礦成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（G072 1
錫基合金成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（G02 02
錫基合金成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（G02 01
稀土鎂合金成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（G02 51
烯唑醇農(nóng)藥純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Diniconazole060885
烯丙基異硫氰酸酯016081
烯丙基硫酸鹽016061
烯丙基甲基硫酸鹽016071
烯丙基二硫化物016051
戊唑醇農(nóng)藥純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)060882
五氯苯/異辛烷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
*(DL-α-生育酚（090400401
*2（E0900000
*1鹽酸鹽 標(biāo)準(zhǔn)品（C17455000
脫氧*內(nèi)酯
土壤中7種PCBs（高含量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（3714
土壤中7種PCBs（低含量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（3715
土壤有效態(tài)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)--棕壤（G07412(ASA-1
土壤有效態(tài)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)--紫色土（G07414(ASA-
土壤有效態(tài)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)--水稻土*（G07415(ASA-4
土壤有效態(tài)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)--紅壤（G07416(ASA-5
土壤有效態(tài)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)-赤紅壤（G07417(ASA-6
土壤有效態(tài)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)--潮土（G0741 (ASA--2
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