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上海撫生實業(yè)有限公司
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閱讀:544發(fā)布時間:2019-3-29
西馬特羅檢測試劑盒實驗樣本的處理方法:
1、血清
血清是常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡單。
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
采血過程中應避免溶血,因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色,而導致檢測的不準確性。同時也應避免細菌污染,因為菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導致檢測的假陽性。
2、血漿
用含抗凝劑的*或離心管采集血液標本,標本采集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
常用的抗凝劑為EDTA、*和*等,檢測時還應仔細閱讀試劑盒說明書,檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。
3、細胞培養(yǎng)上清
取細胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
4、細胞裂解液
1)吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用*消化細胞,加適量培養(yǎng)基將細胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細胞可省略。
2)收集細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預冷的PBS潤洗3次。
3)加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。
4)將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復凍融幾次,使細胞充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎,以達到裂解的目的。
5)4℃ 10000×g 離心10min,除去細胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
5、組織勻漿液
1)將組織樣本用PBS (0.01M, PH 7.4) 沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。
2)將組織塊稱重,記錄后剪碎,碎塊應盡量小,便于勻漿得更充分
3)將組織按一定的比例加入預冷的PBS(臨用前加入蛋白酶抑制劑)勻漿,勻漿時置于冰上或冰浴中。(通常按組織重量:PBS體積=1:9的比例勻漿,例如1g的組織樣本對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,檢測后計算樣品濃度時應乘以相應的稀釋倍數(shù))
4)吸取勻漿液到離心管,4℃ 5000×g 離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
6、尿液、唾液等其他液體生物樣本
1000×g離心20min,取上清即可檢測。
商鋪:http://www.duty-free.cn/st150532/
主營產(chǎn)品:葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細胞生長因子試劑盒
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