磺胺類（SAr）酶聯(lián)免疫（ELISA）試盒使用說(shuō)明書(shū)
1 使用目的：
本試飼料、魚(yú)、（如雞、牛肉和豬肉），血清和尿樣中磺胺類（SAr）殘留的定量檢測(cè)。
2 實(shí)驗(yàn)原理
本試ELISA方法，在微孔板包被有磺胺類（SAr）偶聯(lián)抗原，磺胺類（SAr）標(biāo)準(zhǔn)品或樣品，游離磺胺類（SAr）與微孔條上預(yù)包被的磺胺類（SAr）偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗磺胺類（SAr）抗體酶標(biāo)記物，用 TMB 底物顯色，黃色，用酶標(biāo)儀在 450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)，吸光值與樣品中磺胺類（SAr）含量成反 ，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中磺胺類（SAr）的含量。
3 試
3.1 預(yù)包被的磺胺類（SAr）偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板：1塊（12孔×8條）。
3.2 磺胺類（SAr）標(biāo)準(zhǔn)品：6瓶（1ml/瓶），含量ppb,8.1 ppb。： 0 ppb，0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7
3.3抗磺胺類（SAr）抗體酶
3.4顯色液 A：1瓶（6ml）。
3.5顯色液 B：1瓶（6ml）。：1瓶（6ml）。
3.6終止液：1瓶（6ml），2M硫酸。
3.7*：1瓶（10×, 6ml），用于樣品稀釋用。
3.8濃：1瓶（20×，20ml），用于洗板。
3.9說(shuō)明書(shū)一份。
4 需要而未提供的材料
4.1 設(shè)備
4.1.1波長(zhǎng)450nm酶標(biāo)儀。
4.1.2粉碎機(jī)。
4.1.3量筒。
4.1.4振蕩器。
4.1.5漏斗。
4.1.6Whatman 或相當(dāng)?shù)臑V紙。
4.1.7微量移液器。
4.2 試
4.2.1去離子
4.2.2 甲醇。
5 貯存。
5.1 試2~8℃，
5.2 未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存
6 注意事項(xiàng)
6.1 使用試磺胺類（SAr）酶聯(lián)免疫（ELISA）試盒使用說(shuō)明書(shū)
6.2不要使用過(guò)期試
6.3試，將試（25±2℃），建議至少回溫2小時(shí)。
6.4標(biāo)準(zhǔn)品中含有磺胺類（SAr），使用時(shí)應(yīng)特
6.5終止液中含有硫酸，使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐
6.6不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用，否，操作時(shí)應(yīng)帶手套。
6.7不同批號(hào)試；不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用，否
實(shí)驗(yàn)
6.8稀釋樣本時(shí)必須用本試
6.9混合試，否。
7工作液準(zhǔn)備
7.1磺胺類（SAr）標(biāo)準(zhǔn)品溶液：0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb
7.2濃
7.3*：用蒸餾：用蒸餾
1:20(1+19)稀釋備用
1:10(1+9)稀釋備用
7.3 顯色：已備用，避免光線直照
7.4反應(yīng)終止液：已備用
8樣品處理程序（樣品在提取過(guò)程中，要嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作，提取過(guò)程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋，否會(huì)，樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存）
8.1取10g粉碎的樣品， 20ml 70%甲醇溶液
8.2強(qiáng) 3
8.3用Whatman 濾紙過(guò)濾
8.4取25µl處理后的樣品，
9酶免25µl*于反應(yīng)孔中（樣本稀釋倍數(shù)為2）
9.1實(shí)驗(yàn)須知磺胺類（SAr）酶聯(lián)免疫（ELISA）試盒使用說(shuō)明書(shū)
9.1.1實(shí)驗(yàn)開(kāi)始（25±2℃），時(shí)間約2小時(shí)?；販刂潦覝兀?5±2℃）后再取注：一定保證回溫充，否
9.1.2使用后請(qǐng)立即將試
9.1.3請(qǐng)不要改變，多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存。2~8℃保存
9.1.4請(qǐng)使用的微量移液器
9.1.5操作一旦開(kāi)始，請(qǐng)不要中斷任何程序
9.1.6 ELISA，請(qǐng)嚴(yán)格按照要
9.1.7為避免交叉
9.1.8，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭
9.2
9.2.1預(yù)*行，標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位，*進(jìn)行雙孔檢測(cè)
9.2.2取所需數(shù)量的微孔（微孔條可拆），將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
9.2.3樣品稀釋液（10×）、濃 （20×）稀釋成工作液(蒸餾50µl0.0 ng/ ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液50
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