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技術文章

大鼠抗Ⅱ型膠原抗體(Col Ⅱ Ab)酶聯(lián)免疫分析

閱讀:294發(fā)布時間:2014-12-18

大鼠ELISA試劑盒實驗原理

本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中大鼠抗Ⅱ型膠原抗體(Col Ⅱ Ab)水平。用純化的大鼠抗Ⅱ型膠原(Col Ⅱ) 抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入抗Ⅱ型膠原抗體(Col Ⅱ Ab),再與HRP標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗Ⅱ型膠原抗體(Col Ⅱ Ab)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠抗Ⅱ型膠原抗體(Col Ⅱ Ab)濃度。 

大鼠ELISA試劑盒注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

大鼠ELISA試劑盒保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個月


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