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磷酸化細(xì)胞角蛋白17抗體

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更新時(shí)間:2018-01-17 15:30:45瀏覽次數(shù):218次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

磷酸化細(xì)胞角蛋白17抗體的概念:
Z初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,故曾把抗體統(tǒng)稱(chēng)為丙種(γ)球蛋白。后來(lái)發(fā)現(xiàn),抗體并不都在γ區(qū);并且位于γ區(qū)的球蛋白,也不一定都具有抗體活性

詳細(xì)介紹

磷酸化細(xì)胞角蛋白17抗體antibody,Ab)是機(jī)體免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后產(chǎn)生的特異性球蛋白,稱(chēng)免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構(gòu)和抗原性的不同,可將為類(lèi)Ig分為IgG、IgA、IgMIgDIgE等五大類(lèi)。由遺傳基因決定所產(chǎn)生的抗體,稱(chēng)天然抗體(natural antibody),由抗原激發(fā)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的抗體,稱(chēng)免疫抗體(immune antibody)或稱(chēng)特異地性抗體。人工制備的特異性抗體又可分為多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類(lèi)型。

磷酸化細(xì)胞角蛋白17抗體抗血清的鑒定

抗血清的效價(jià)可根據(jù)抗體的不同性質(zhì),分別采用環(huán)狀沉淀試驗(yàn)、瓊脂雙向擴(kuò)散、單向免疫擴(kuò)散、溶血試驗(yàn)、凝集反應(yīng)、酶免疫反應(yīng)及放射免疫等方法進(jìn)行測(cè)定。檢查抗血清的純度可采用免疫電泳、瓊脂雙向擴(kuò)散及交*反應(yīng)試驗(yàn)等方法檢測(cè)。

1)取適量Protein A+G Beads懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。

2)含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后(確認(rèn)pH值為7±0.5),緩慢加入層析柱。

3)10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無(wú)蛋白檢出。

4)加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封閉流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復(fù)三次。測(cè)定 OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測(cè)純度。也可以選擇0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脫。

5)洗脫后的抗體立即加入2/5體積的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,或者透析,緩沖液通常為PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。

6)濃縮到所需體積,加入50%甘油;測(cè)定效價(jià)后,分裝并保存在-20℃,避免凍結(jié)。

磷酸化細(xì)胞角蛋白17抗體的特異性是指對(duì)相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力。特異性高,抗體識(shí)別能力就強(qiáng),通常以交*反應(yīng)率來(lái)表示。交*反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。

磷酸化細(xì)胞角蛋白17抗體相關(guān)產(chǎn)品如下:hz-3051R    Phospho-BAP1(Ser592)  磷酸化乳腺癌易感基因1抗體(人)
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