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上海滬震實業(yè)有限公司
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閱讀:680發(fā)布時間:2014-12-10
血清是細(xì)胞培養(yǎng)中zui重要的元素之一。在實驗室操作中要注意及處理方法:
1. 血清保存: 建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2. 解凍血清的方法: 建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
3. 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
4. 為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時,*使用熱滅活血清。
5. 有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節(jié)省您寶貴的時間,更確保血清的質(zhì)量!
6. 為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀?
胎牛血清沒有預(yù)老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的質(zhì)量。*在-20℃儲存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。
7. 如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。xy-E10096 【中文名稱】:人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human CXC chemokine ligand 16 (CXCL16) ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10097 【中文名稱】:人CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human CXC chemokine receptor 3 (CXCR3) ELISA kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10098 【中文名稱】:人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human γ interferon -inducible protein 16/p16 (IFI16/p16) ELISA kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10099 【中文名稱】:人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human stromal cell derived factor- 1a (SDF-1a/CXCL12) ELISA kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10100 【中文名稱】:人淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human lymphocyte chemokine (Lptn/LTN/XCL1) ELISA kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10101 【中文名稱】:人α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human interferon- α (IFN-α) ELISA kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10102 【中文名稱】:人可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human soluble CD86 (B7-2/sCD86) ELISA kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10103 【中文名稱】:人白介素27(IL-27)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human interleukin- 27 (IL-27) ELISA kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10104 【中文名稱】:人白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human interleukin- 23 (IL-23) ELISA kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10105 【中文名稱】:人巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10106 【中文名稱】:人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human tissue factor pathway inhibitor (TFPI) ELISA kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10107 【中文名稱】:人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human interferon -inducible protein 10 (IP-10/CXCL10) ELISA kit 規(guī)格:96T/48T
xy-E10108 【中文名稱】:人白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human interleukin- 1 (IL-1) ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
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