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公司動態(tài)

RNase清除劑A型說明書

閱讀:565發(fā)布時間:2017-10-16

RNase清除劑A型

(原固相RNase 清除劑)

Surface RNase Erasol

 

產(chǎn)品及特點

固相RNase清除劑(Surface RNase Erasol)是天澤基因*開發(fā)的特殊的RNase滅活劑。它含有多種成分,能滅活固體表面的RNase污染,保障RNA工作環(huán)境的清潔。

  • 本產(chǎn)品原液能在5分鐘內(nèi)將固體表面的多達100 ug的RNase*滅活,效力和速度遠遠高于常用的DEPC。
  • 此外還能滅活RNase T1、 RNase H、BAL31、 S1Mung bean nuclease等RNase和DNase。
  • 無毒跟強致癌的DEPC不同,本產(chǎn)品對人體沒有任何毒害。
  • 使用簡單。處理后不需要高壓滅菌。

 

規(guī)格及成分

成   份

100 mL包裝

250 mL包裝

本產(chǎn)品

100 mL

250 mL

噴壺

-

1個

使用手冊

1份

1份

 

 

運輸及保存

常溫運輸和保存,有效期兩年

 

自備試劑

蒸餾水

 

使用方法

水的處理

直接將固相RNase清除劑原液按1:1000的比例加入到需要處理的水中,混合均勻后室溫放置24小時即可直接使用,得到的水可以配制電泳溶液和裂解液。但如果需要溶解RNA,建議使用液相RNase清除劑(CAT#:3091)。

工作平臺的清潔:

直接將固相RNase清除劑原液或10倍的新鮮稀釋液噴于臺面,5分鐘后用普通吸水紙擦凈,zui后用沾有固相RNase清除劑1000倍新鮮稀釋液的吸水紙擦凈,晾干。

注意:由于一般的工作平臺RNase污染都很嚴重,天澤基因建議使用固相RNase清除劑原液或十倍的新鮮稀釋液(新鮮稀釋液的存放時間不要超過一天),不要使用稀釋度大于十倍的稀釋液。

實驗儀器的清潔:

用浸有固相RNase清除劑原液或10倍的新鮮稀釋液的紙擦拭儀器表面,再用吸水紙擦凈,zui后用沾有固相RNase清除劑1000倍新鮮稀釋液的吸水紙擦凈,晾干。用固相RNase 清除劑原液處理金屬器械的時間不能超過5分鐘。

注意:由于一般的實驗儀器RNase污染都很嚴重,天澤基因建議使用固相RNase 清除劑原液或十倍的新鮮稀釋液(新鮮稀釋液的存放時間不要超過一天),不要使用稀釋度大于十倍的稀釋液。

玻璃和塑料器皿的清潔:

將器皿浸泡在固相RNase 清除劑的10或100倍的新鮮稀釋液中,靜置處理5分鐘后取出,固相RNase清除劑1000倍或10000倍新鮮稀釋液浸泡二次以上,倒立晾干后備用。

注意:由于一般的清洗后的玻璃和塑料器皿的RNase污染都比較嚴重(但一般比工作平臺實驗儀器干凈),天澤基因建議*次浸泡使用固相RNase 清除劑的10倍或100倍新鮮稀釋液(新鮮稀釋液的存放時間不要超過一天),不要使用稀釋度大于1000倍的稀釋液。

移液槍的清潔:

根據(jù)生產(chǎn)廠家的使用手卸下移液槍的前端,留下接口塞和圈套后將其浸放在固相RNase清除劑的10或100倍的新鮮稀釋液中一分鐘,固相RNase清除劑1000倍或10000倍新鮮稀釋液*沖洗后,晾干,裝回移液槍。

塑料離心管和滴頭的清潔:

將反應(yīng)塑料離心管和滴頭充分浸泡在固相RNase清除劑的1000倍的新鮮稀釋液中5分鐘以上(不要有氣泡), 然后再用固相RNase清除劑1000倍或10000倍的新鮮稀釋液充分浸泡兩次,試管或離心管可立即使用或干燥后備用。

 

技術(shù)資料

如何檢測本產(chǎn)品滅活RNase的效果

在兩個1.5mL塑料離心管中分別加入RNase溶液,使RNase總量在10-100 ug之間,自然晾干(需要一天左右)或加熱使水份蒸發(fā),一個樣品加入1 mL 本產(chǎn)品原液,另一個樣品加入1 mL無RNase的水(對照),室溫靜置五分鐘(注意不要讓管壁上產(chǎn)生氣泡,因為它會阻擋溶液與管壁上RNase分子的結(jié)合),然后小心吸出溶液并加入1 mL水,靜置1分鐘后小心吸出,重復(fù)水洗步驟一次,zui后加入2.5 ug總RNA樣品, 37℃保溫30分鐘后加RNA電泳上樣液,電泳觀察RNA分子的完整性。完整的RNA表示該管中RNase已經(jīng)被滅活。

固相RNase 清除劑稀釋度與RNase滅活效果的關(guān)系

 

 

RNase量(1.5mL離心管中)

稀釋度

0.5 ug

5 ug

50 ug

100 ug

原液

+

+

+

+

10倍稀釋

+

+

+

+

100倍稀釋

+

+

+

-

1000倍稀釋

+

-

-

-

 

表注:所有滅活條件均為室溫靜置放置5分鐘,“+”表示滅活,“-”表示部分滅活或不能滅活。RNase為液體溶液加入到1.5 mL塑料離心管中晾而得,稀釋液為新鮮稀釋。

 

相關(guān)資料

遠離EPC的三大理由

1.DEPC對人體有害。DEPC為高活性烷化試劑,能對蛋白質(zhì)進行共價修飾,使其組胺基團的乙氧基甲酸化(RNase A活性位點有兩個*,故能被滅活);同時它還能使RNA分子中沒配對的腺嘌呤羧甲基化,改變其活性,嚴重時甚至?xí)绊慠NA形成雜交雙鏈的能力。由于上述反應(yīng)沒有選擇性,故對人體十分有害,歸為強致癌物,使用時必須十分小心。

2.不能用DEPC處理下列溶液:一是含一級胺的試劑,如MOPS,TRIS, HEPES,PBS等,因其所含一級胺是DEPC攻擊的目標(biāo),它們之間會發(fā)生化學(xué)反應(yīng);二是不能高壓滅菌的溶液(如DTT,dNTP,MgCl2等),因為DEPC必須通過高壓滅菌去除;三是不能用于某些高濃度溶液(如0.1 M NH4Ac或NaAc),在這些溶液中DEPC的半衰期只有幾分鐘;四是不能用于pH值在4及以下的溶液,在此條件下DEPC對RNase沒有滅活作用;五是DEPC不能與Polycarbonate和Polystyrene等塑料材料接觸。

3.DEPC溶液不適合用于某些實驗;一不能用于測OD,因為OD讀數(shù)跟pH有關(guān),DEPC在溶液中分解后變成乙醇和CO2,部分CO2與水反應(yīng)形成碳酸,導(dǎo)致pH降低,進而降低OD值。二不能用于體外轉(zhuǎn)錄,Ambion報道0.1% DEPC-treated water能使轉(zhuǎn)錄效率降低40%,這可能與DEPC降解產(chǎn)物有關(guān)。

 

關(guān)聯(lián)產(chǎn)品

液相RNase清除劑(CAT#:3091)


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