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內(nèi)皮細胞培養(yǎng)方法

閱讀：307發(fā)布時間：2017-4-10

內(nèi)皮細胞培養(yǎng)方法

1．取產(chǎn)后的新鮮臍帶。如不立即培養(yǎng)可以保存于4℃中，但不宜超過12小時。無菌剪取長10～15厘米一段。其它如胚胎和幼體動物的大血管，亦可用于培養(yǎng)。


2．先用三通注射器吸溫PBS液注入臍帶的靜脈中，洗除殘血，注入口處宜用線繩結扎，以防液體返流。 

3．用*夾緊臍帶一端，從另端向臍靜脈中徐徐注入zui終濃度為0.1％的膠原酶，待末端出現(xiàn)液體后結扎之，令充滿血管，注入口亦應結扎，以防液體返流，消化3～10分鐘。 

4．吸出含有內(nèi)皮細胞的消化液，注入離心管中，為獲取更多細胞，可再注入溫PBS沖洗2～3次*清除干凈殘余細胞，一并注入離心管中離心。

5．吸除上清，加1640培養(yǎng)液，制成細胞懸液，接種入瓶皿中培養(yǎng)，順利時2～3天內(nèi)細胞即可長成單層。


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