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ELISA試劑盒
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細(xì)胞試劑

細(xì)胞傳代的步驟

時間:2015-4-17閱讀:668
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1.ELISA試劑盒無菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭雙手,進(jìn)行消毒。

2.倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否需要傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù),將培養(yǎng)用液置37℃下預(yù)熱。

3.超凈臺臺面應(yīng)整潔無污漬,用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。

4.打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右,ELISA試劑盒關(guān)閉超凈臺的紫外燈,打開抽風(fēng)機(jī)清潔空氣,除去臭氧。

5.點(diǎn)燃酒精燈;取出無菌試管,吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)。

6.將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。

7.倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2—3mLHanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下。

8.每個大培養(yǎng)瓶加入1mL胰酶,小瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察,當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中。

9.加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋,適度擰緊后再稍回轉(zhuǎn),以利于CO2氣體的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。

10.對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,ELISA試劑盒可將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。

性別決定區(qū)Y框蛋白9(SOX9)ELISA試劑盒 ,英文名: SOX9 ELISA Kit
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信號素6A(SEMA6A)ELISA試劑盒 ,英文名: SEMA6A ELISA Kit
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