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ELISA試劑盒
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elisa測定試劑盒檢測程序

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elisa測定試劑盒檢測程序:
在運(yùn)用前,將一切試劑和樣品室溫。再次離心樣品凍結(jié)后測定前。據(jù)建議,一切樣品和規(guī)范來測定一式兩份。
1。準(zhǔn)備好一切試劑,作業(yè)規(guī)范和樣品在前面的章節(jié)中。
2。請斷定井?dāng)?shù)的運(yùn)用,并把任何剩下的井和入袋干燥劑,密封保鮮袋,將未運(yùn)用的井在4°C的含量布局表
3。每孔參加100μl的規(guī)范和樣品。封面用膠粘帶供給。孵育2小時(shí),在37℃下一盤布局記載規(guī)范和樣品檢測。
?
4。向每孔中參加100μl的HRP-抗生物素蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一個(gè)新的粘接劑條。溫育1小時(shí),在37℃下
5。重復(fù)的希望/洗刷過??程中,在進(jìn)程6的5倍。
6。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中。孵育15-30分鐘,在37℃下避光
7。一站式解決方案,每孔參加底物,悄悄晃動酶標(biāo)板,以保證充沛混合。
8。每孔中取出的液體,不洗。
9。向每孔中參加100μl生物素抗體(1倍)。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。為1小時(shí)孵育在37℃下(生物素抗體(1X)可能會呈現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫,悄悄混勻,直到呈現(xiàn)均勻解決方案。)
10。吸液的各孔和洗刷,共洗刷三次重復(fù)該進(jìn)程兩次。洗凈,每孔填充洗刷緩沖液(200μL)運(yùn)用噴瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,靜置2分鐘,*鏟除液體的每一步是*的杰出的功能。zui后一次洗刷后,鏟除任何剩下洗刷緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂改對潔凈的紙巾。
11。在5分鐘內(nèi),設(shè)置至450nm,運(yùn)用酶標(biāo)儀測定各孔的光密度。如果波長校對,設(shè)置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校對板的光學(xué)缺點(diǎn)。在450nm處未經(jīng)批改讀數(shù)直接,可能會比較高,不太。
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