elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗關(guān)鍵步驟
1.重要的洗刷：
如果洗刷不充分，會形成一系列的差異和高布景zui終導(dǎo)致試驗成果偏差大。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會添加布景噪音。條件答應(yīng)的情況下，恰當(dāng)添加洗刷液中的鹽濃度，這會阻撓非特異結(jié)合反響。如果布景過高，置疑洗刷不行時，能夠測驗添加洗刷次數(shù)。
2.關(guān)鍵的關(guān)閉：
關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點。ELISA試劑盒這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的時機。如果布景過高，置疑關(guān)閉不充分，那么能夠測驗運用更高濃度的關(guān)閉液，或恰當(dāng)延長關(guān)閉時刻現(xiàn)在主要有兩種類型的關(guān)閉液：蛋白和非離子型去污劑。運用的類型須取決于多個要素，包含微孔板的外表試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的關(guān)閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。
3.抗體濃度須優(yōu)化：
如果試劑稍有不同，ELISA試劑盒則可能需求優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會添加布景。為了防止這一點，切勿運用過多的一抗或二抗。
4.、檢測試劑要適量：
必定不能夠運用過多的檢測試劑。如果濃度過高，或許未正確稀釋，則會導(dǎo)致高布景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時應(yīng)加入停止液。
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