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147次elisa酶聯(lián)免疫試劑盒雙抗原夾心法測(cè)抗體
反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物,以檢測(cè)相應(yīng)的抗體。與間接法測(cè)抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測(cè)定,因此其敏感度相對(duì)高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測(cè)常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,尋找合適的標(biāo)記方法。
雙位點(diǎn)一步法
在雙抗體夾心法測(cè)定抗原時(shí),如應(yīng)用針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體,則在測(cè)定時(shí)可使標(biāo)本的加入和酶標(biāo)抗體的加入兩步并作一步。這種雙位點(diǎn)一步不但簡(jiǎn)化了操作,縮短了反應(yīng)時(shí)間,如應(yīng)用高親和力的單克隆抗體,測(cè)定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應(yīng)用使測(cè)定抗原的ELISA提高到新水平。
在一步法測(cè)定中,應(yīng)注意鉤狀效應(yīng)(hookeffect),類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象。當(dāng)標(biāo)本中待測(cè)抗原濃度相當(dāng)高時(shí),過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成夾心復(fù)合物,所得結(jié)果將低于實(shí)際含量。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)甚至可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
間接法測(cè)抗體
間接法間接法是檢測(cè)抗體zui常用的方法,其原理為利用酶標(biāo)記的抗體以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:
⑴將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
⑵加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他抗體及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合,在洗滌過程中被洗去。
⑶加酶標(biāo)抗抗體:與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合,從而使該抗體間接地標(biāo)記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測(cè)人對(duì)某種疾病的抗體,可用酶標(biāo)羊抗人IgG抗體。
⑷加底物顯色:顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體的量。
本法主要用于對(duì)病原體抗體的檢測(cè)而進(jìn)行傳染病的診斷。間接法的優(yōu)點(diǎn)是只要變換包被抗原就可利用同一酶標(biāo)抗抗體建立檢測(cè)相應(yīng)抗體的方法。
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒VA 人維生素A 規(guī)格: 48T/96T
MTF 人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白 規(guī)格: 48T/96T
MAP-2 人微管相關(guān)蛋白2 規(guī)格: 48T/96T
MAP-2 人微管相關(guān)蛋白2 規(guī)格: 48T/96T
omentin 人網(wǎng)膜素 規(guī)格: 48T/96T
AOPP 人晚期氧化蛋白產(chǎn)物 規(guī)格: 48T/96T
RAGE/AGER 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體 規(guī)格: 48T/96T
AGEs 人晚期糖基化終末產(chǎn)物 規(guī)格: 48T/96T
extein 人外顯肽 規(guī)格: 48T/96T
SA 人唾液酸 規(guī)格: 48T/96T
DUTP 人脫氧尿三磷酸 規(guī)格: 48T/96T
DPD 人脫氧膠原吡啶交聯(lián) 規(guī)格: 48T/96T
DNase-Ⅰ 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ 規(guī)格: 48T/96T
DPD 人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉 規(guī)格: 48T/96T
DHEA-S 人脫氫表雄酮硫酸酯 規(guī)格: 48T/96T
MT 人褪黑素 規(guī)格: 48T/96T
HAase 人透明質(zhì)酸酶 規(guī)格: 48T/96T
HABP 人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白 規(guī)格: 48T/96T
HA 人透明質(zhì)酸 規(guī)格: 48T/96T
CP/CER 人銅藍(lán)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
HOXB2 人同源框B2 規(guī)格: 48T/96T
GTC 人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體 規(guī)格: 48T/96T
FE 人鐵蛋白 規(guī)格: 48T/96T
AZU 人天青殺素 規(guī)格: 48T/96T
GOT/GPT 人天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶 規(guī)格: 48T/96T
AST 人天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格: 48T/96T
SMAF 人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子 規(guī)格: 48T/96T
iNV 人套膜蛋白 規(guī)格: 48T/96T
iNV 人套膜蛋白 規(guī)格: 48T/96T
GP-MM 人糖原磷酸化酶同工酶MM 規(guī)格: 48T/96T
GP-II 人糖原磷酸化酶同工酶II 規(guī)格: 48T/96T
GP-BB 人糖原磷酸化酶同工酶BB 規(guī)格: 48T/96T
GSK 人糖原合成酶激酶 規(guī)格: 48T/96T
CDT 人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白 規(guī)格: 48T/96T
GR 人糖皮質(zhì)類固醇受體 規(guī)格: 48T/96T
GPI 人糖磷脂酰肌醇 規(guī)格: 48T/96T
CA19-9 人糖鏈抗原19-9 規(guī)格: 48T/96Telisa酶聯(lián)免疫試劑盒
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