小鼠三磷酸肌醇酶聯(lián)免疫說(shuō)明書(shū)盒使

本 試 劑 盒 僅 供 研 究 使 用 。  

檢 測(cè) 范 圍 檢 測(cè) 范 圍 檢 測(cè) 范 圍 檢 測(cè) 范 圍 ： ： ： ：                                                                                                                     9 6 T  

1 . 2 n g / m l   -   4 5 n g / m l  

使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 ： ： ： ：  

本 試 劑 盒 用 于 測(cè) 定 小 鼠 血 清 、 血 漿 及 相 關(guān) 液 體 樣 本 中 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 含 量 。  

實(shí) 驗(yàn) 原 理 實(shí) 驗(yàn) 原 理 實(shí) 驗(yàn) 原 理 實(shí) 驗(yàn) 原 理  

本 試 劑 盒 應(yīng) 用 雙 抗 體 夾 心 法 測(cè) 定 標(biāo) 本 中 小 鼠 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 水 平 。 用 純 化 的 小 鼠 三 磷

酸 肌 醇 ( I P 3 ) 抗 體 包 被 微 孔 板 ， 制 成 固 相 抗 體 ， 往 包 被 單 抗 的 微 孔 中 依 次 加 入 三 磷 酸 肌 醇

( I P 3 ) ， 再 與 H R P 標(biāo) 記 的 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 抗 體 結(jié) 合 ， 形 成 抗 體 - 抗 原 - 酶 標(biāo) 抗 體 復(fù) 合 物 ， 經(jīng) 過(guò)

徹 底 洗 滌 后 加 底 物 T M B 顯 色 。 T M B 在 H R P 酶 的 催 化 下 轉(zhuǎn) 化 成 藍(lán) 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 轉(zhuǎn) 化

成 zui 終 的 黃 色 。 顏 色 的 深 淺 和 樣 品 中 的 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 呈 正 相 關(guān) 。 用 酶 標(biāo) 儀 在 4 5 0 n m 波 長(zhǎng)

下 測(cè) 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 通 過(guò) 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 計(jì) 算 樣 品 中 小 鼠 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 濃 度 。    

試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成    

1   3 0 倍 濃 縮 洗 滌 液   2 0 m l × 1 瓶   7   終 止 液   6 m l × 1 瓶  

2   酶 標(biāo) 試 劑   6 m l × 1 瓶   8   標(biāo) 準(zhǔn) 品 （ 8 0 n g / m l ）   0 . 5 m l × 1 瓶  

3   酶 標(biāo) 包 被 板   1 2 孔 × 8 條   9   標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液   1 . 5 m l × 1 瓶  

4   樣 品 稀 釋 液   6 m l × 1 瓶   1 0   說(shuō) 明 書(shū)   1 份  

5   顯 色 劑 A 液   6 m l × 1 瓶   1 1   封 板 膜   2 張      

6   顯 色 劑 B 液   6 m l × 1 / 瓶   1 2   密 封 袋   1 個(gè)  

標(biāo) 本 標(biāo) 本 標(biāo) 本 標(biāo) 本 要 求 要 求 要 求 要 求    

1 ． 標(biāo) 本 采 集 后 盡 早 進(jìn) 行 提 取 ， 提 取 按 相 關(guān) 文 獻(xiàn) 進(jìn) 行 ， 提 取 后 應(yīng) 盡 快 進(jìn) 行 實(shí) 驗(yàn) 。 若 不 能

馬 上 進(jìn) 行 試 驗(yàn) ， 可 將 標(biāo) 本 放 于 - 2 0 ℃ 保 存 ， 但 應(yīng) 避 免 反 復(fù) 凍 融  

2 ． 不 能 檢 測(cè) 含 N a N 3 的 樣 品 ， 因 N a N 3 抑 制 辣 根 過(guò) 氧 化 物 酶 的 （ H R P ） 活 性 。  

操 作 步 驟 操 作 步 驟 操 作 步 驟 操 作 步 驟  

1 .   標(biāo) 準(zhǔn) 品 的 稀 釋 ： 本 試 劑 盒 提 供 原 倍 標(biāo) 準(zhǔn) 品 一 支 ， 用 戶(hù) 可 按 照 下 列 圖 表 在 小 試 管 中 進(jìn) 行 稀

釋 。  

4 0 n g / m l   5 號(hào) 標(biāo) 準(zhǔn) 品   1 5 0 μ l 的 原 倍 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入 1 5 0 μ l 標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液  

2 0 n g / m l   4 號(hào) 標(biāo) 準(zhǔn) 品   1 5 0 μ l 的 5 號(hào) 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入 1 5 0 μ l 標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液  

1 0 n g / m l   3 號(hào) 標(biāo) 準(zhǔn) 品   1 5 0 μ l 的 4 號(hào) 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入 1 5 0 μ l 標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液  

5 n g / m l   2 號(hào) 標(biāo) 準(zhǔn) 品   1 5 0 μ l 的 3 號(hào) 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入 1 5 0 μ l 標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液  

2 . 5 n g / m l   1 號(hào) 標(biāo) 準(zhǔn) 品   1 5 0 μ l 的 2 號(hào) 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入 1 5 0 μ l 標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液  

2 .   加 樣 ： 分 別 設(shè) 空 白 孔 （ 空 白 對(duì) 照 孔 不 加 樣 品 及 酶 標(biāo) 試 劑 ， 其 余 各 步 操 作 相 同 ） 、 標(biāo) 準(zhǔn) 孔 、

待 測(cè) 樣 品 孔 。 在 酶 標(biāo) 包 被 板 上 標(biāo) 準(zhǔn) 品 準(zhǔn) 確 加 樣 5 0 μ l ， 待 測(cè) 樣 品 孔 中 先 加 樣 品 稀 釋 液 4 0 μ l ，