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ELISA試劑盒
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肌酸轉(zhuǎn)運蛋白(CRT)ELISA試劑盒說明書

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肌酸轉(zhuǎn)運蛋白(CRT)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用  標本:體液

肌酸轉(zhuǎn)運蛋白(CRT)ELISA試劑盒試驗原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。

肌酸轉(zhuǎn)運蛋白(CRT)ELISA試劑盒自備材料
1.蒸餾水。
2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項
1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

肌酸轉(zhuǎn)運蛋白(CRT)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-800pg/ml

4、敏感度: 1.0 pg/ml

 MTL  大鼠胃動素  規(guī)格: 48T/96T

 Pepsin  大鼠胃蛋白酶  規(guī)格: 48T/96T

大鼠胃腸癌標志物CA199ELISA Kit,48T/96T  大鼠胃腸癌標志物CA199ELISA Kit,48T/96T  規(guī)格: 48T/96T

 VK1  大鼠維生素K1  規(guī)格: 48T/96T

 VE  大鼠維生素E  規(guī)格: 48T/96T

 VD3  大鼠維生素D3  規(guī)格: 48T/96T

 VD2  大鼠維生素D2  規(guī)格: 48T/96T

 VD  大鼠維生素D  規(guī)格: 48T/96T

 VC  大鼠維生素C  規(guī)格: 48T/96T

 VB6  大鼠維生素B6  規(guī)格: 48T/96T

 VB12  大鼠維生素B12  規(guī)格: 48T/96T

 VA  大鼠維生素A  規(guī)格: 48T/96T

 omentin  大鼠網(wǎng)膜素  規(guī)格: 48T/96T

 AGEs  大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物  規(guī)格: 48T/96T

 DPD  大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉  規(guī)格: 48T/96T

 DHEA-S  大鼠脫氫表雄酮硫酸酯  規(guī)格: 48T/96T

 HABP  大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白  規(guī)格: 48T/96T

 HA  大鼠透明質(zhì)酸  規(guī)格: 48T/96T

 FE  大鼠鐵蛋白  規(guī)格: 48T/96T

 GP-MM  大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM  規(guī)格: 48T/96T

 GP-II  大鼠糖原磷酸化酶同工酶II  規(guī)格: 48T/96T

 GP-BB  大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB  規(guī)格: 48T/96T

 GSK  大鼠糖原合成酶激酶  規(guī)格: 48T/96T

 CDT  大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白  規(guī)格: 48T/96T

 GR  大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體  規(guī)格: 48T/96T

 GHbA1c  大鼠糖化血紅蛋白A1c  規(guī)格: 48T/96T

 gp130  大鼠糖蛋白130  規(guī)格: 48T/96T

 CA-2  大鼠碳酸酐酶2  規(guī)格: 48T/96T

 CA  大鼠碳酸酐酶  規(guī)格: 48T/96T

 PLGF  大鼠胎盤生長因子  規(guī)格: 48T/96T

 TREM-1  大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1  規(guī)格: 48T/96T

 MBP  大鼠髓磷脂堿性蛋白  規(guī)格: 48T/96T

大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG

大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG 規(guī)格: 48T/96T

 MPO  大鼠髓過氧化物酶  規(guī)格: 48T/96T

 aFGF-1  大鼠酸性成纖維細胞生長因子1  規(guī)格: 48T/96T

 AQP-5  大鼠水通道蛋白5  規(guī)格: 48T/96T

 AQP-4  大鼠水通道蛋白4  規(guī)格: 48T/96T

 AQP-3  大鼠水通道蛋白3  規(guī)格: 48T/96T

 AQP-2  大鼠水通道蛋白2  規(guī)格: 48T/96T

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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