可用酶標羊抗人IgG抗體

操作步驟如下：
（1）將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原：洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
（2）加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合，在洗滌過程中被洗去。
（3）加酶標抗抗體：與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合，從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。

例如欲測人對某種疾病的抗體。

1．取出酶標板，設(shè)空白孔，依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標準品于空白微孔中（空白孔視為0號標準品，用醫(yī)用蒸餾水替代）

2、分別標記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）。
3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘；
4、將酶標板板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體;
5、每個孔中加滿應(yīng)用洗滌液后，輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。
6、重復(fù)第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。
7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體。
10、每個孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后，室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。
11、重復(fù)第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。
12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）
13、將酶標板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。
14、每個微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。
15、在酶標儀上，450nm處測定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進行測定。