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ELISA試劑盒
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大鼠試劑盒檢測程序方法

時間:2021/1/28閱讀:652
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大鼠試劑盒檢測程序:
1.  加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板:同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板:同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ,置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

大鼠試劑盒步驟:

1.加樣

  1. 除包被外都需45度加樣

  2.加樣體積要準(zhǔn)確

  3.管底加樣,不能加在管壁上

  4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴  

  1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

  2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

  3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

  4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌  

  1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。

  2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板  

  1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。

  2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

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