elisa測定試劑盒檢測注意事項(xiàng)
Q1：為什么所有試劑和檢測樣本要平衡至室溫后再進(jìn)行加樣操作？
A1：溫度是ELISA結(jié)合反應(yīng)的重要影響因素。為了使所有樣本在一致的溫度下反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)前務(wù) 必將所有試劑平衡至室溫，包括檢測樣本。避免因溫度的動(dòng)力學(xué)反應(yīng)差異而導(dǎo)致ELISA檢測結(jié) 果的不準(zhǔn)確。
Q2：為什么標(biāo)準(zhǔn)曲線線性較差？
A2：按照推薦方式保存標(biāo)準(zhǔn)品；溶解標(biāo)準(zhǔn)品之前需短暫離心，*收集粉末；確保標(biāo)準(zhǔn)品* 溶解和混勻（大約10min），然后再進(jìn)行后續(xù)的系列稀釋步驟，確保每一步都充分混勻且 移液；顯色的恰當(dāng)終止；選擇合適的數(shù)學(xué)擬合方程繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
Q3：ELISA實(shí)驗(yàn)為什么必須設(shè)置復(fù)孔？
A3：為獲得更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，強(qiáng)烈建議標(biāo)準(zhǔn)品及樣本進(jìn)行復(fù)孔檢測。 因?yàn)閺?fù)孔檢測可以：
★計(jì)算平均值，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確；
★解決實(shí)驗(yàn)中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象；
★計(jì)算CV值，對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作和試劑盒的精密度進(jìn)行評(píng)估。
Q4：為什么實(shí)驗(yàn)過程中孵育、洗滌需要振蕩？如何振蕩？
A4：振蕩孵育使反應(yīng)更充分，振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標(biāo)96孔微孔板振蕩器。 孵育過程振蕩，可以加快、加強(qiáng)抗原抗體間的相互碰撞接觸，使得反應(yīng)過程更加*，OD值通 常會(huì)比未振蕩孵育的結(jié)果要高；洗滌過程振蕩，可以使洗板更干凈，在很大程度上能降低背景 值，同時(shí)可以提高試劑盒檢測的靈敏度。
Q5：何時(shí)終止ELISA反應(yīng)？
A5：ELISA實(shí)驗(yàn)zui終需要酶催化底物顯色反應(yīng)來完成，在zui合適的時(shí)間終止反應(yīng)是ELISA實(shí)驗(yàn)成 功的重要因素。在HRP-TMB酶反應(yīng)系統(tǒng)中，當(dāng)zui高濃度標(biāo)準(zhǔn)品顏色不再變深，倒數(shù)2-3個(gè)濃度標(biāo) 準(zhǔn)品顏色開始有淺藍(lán)色時(shí)，便需要終止反應(yīng)；或者也可以根據(jù)zui高濃度標(biāo)準(zhǔn)品孔在620nm的OD 值來決定，OD620=0.9-0.95之間時(shí)即可終止。
Q6：為什么酶標(biāo)儀讀數(shù)時(shí)必須選用雙波長？
A6：首先，酶標(biāo)儀使用前務(wù)必預(yù)熱10-15min，使測讀結(jié)果更穩(wěn)定。其次，ELISA實(shí)驗(yàn)采用雙波 長測定吸光度，可以排除單波長檢測時(shí)的測定干擾（標(biāo)本的濃度，干擾色等）。一般采用zui大 波長作為參照波長，在參照波長下，檢測物的吸光值zui小，檢測波長和參照波長的吸光值之差 可以消除非特異性吸收；因此，雙波長測定，可zui大限度的消除指紋、雜質(zhì)及不透光的物質(zhì)對(duì) 酶標(biāo)儀讀數(shù)帶來的誤差，以保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度。
elisa測定試劑盒小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒    ，英文名：    FⅩ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒    ，英文名：    FⅨ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒    ，英文名：    FⅧ-Ag ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅷ(FⅧ)ELISA試劑盒    ，英文名：    FⅧ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISA試劑盒    ，英文名：    FⅦ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅵ(FⅥ)ELISA試劑盒    ，英文名：    FⅥ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅴ(FⅤ)ELISA試劑盒    ，英文名：    FⅤ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅳ(FⅣ)ELISA試劑盒    ，英文名：    FⅣ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒    ，英文名：    FⅢ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒    ，英文名：    FⅡ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅰ(FⅠ)ELISA試劑盒    ，英文名：    FⅠ ELISA Kit
小鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒    ，英文名：    F1+2 ELISA Kit
小鼠凝血酶受體(TR)ELISA試劑盒    ，英文名：    TR ELISA Kit
小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒    ，英文名：    TAT ELISA Kit
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒    ，英文名：    Gelsolin ELISA Kit
小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒    ，英文名：    ALB ELISA Kit
小鼠尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA試劑盒    ，英文名：    UPP1 ELISA Kit
小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒    ，英文名：    PLAUR/uPAR ELISA Kit
小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒    ，英文名：    uPA ELISA Kit
小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒    ，英文名：    visfatin ELISA Kit
小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒    ，英文名：    vaspin ELISA Kit
小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒    ，英文名：    EL ELISA Kit
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒    ，英文名：    eNOS-3 ELISA Kit
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