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ELISA試劑盒
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elisa檢測試劑盒方法

時間:2017/8/16閱讀:603
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elisa檢測試劑盒基本信息 
 甲狀腺激素是甲狀腺所分泌的激素。 英文名稱:thyroxin(e) 別名:干甲狀腺 ,甲狀腺粉 分子式:C15H11O4I4N 相對分子質量:776.93。 物理性質:白色針狀晶體。無臭。無味。遇光變質。熔點231-233℃(分解)。不溶于水和乙醇等普通有機溶劑。溶于含有無機酸或堿的乙醇,也溶于氫氧化堿和碳酸堿溶液。在其酸性乙醇溶液中加入亞硝酸鈉,加熱即呈黃色,再加過量氨水即變?yōu)榉奂t色。 化學本質:甲狀腺素即為T4,為四碘甲狀腺原氨酸。 制?。嚎捎膳?、羊、豬等的甲狀腺中提取,或由人工合成。
方法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
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