在ELISA測定試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。
ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA試劑盒應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。無論是水浴還是濕盒溫育，反應(yīng)板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng)，操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時(shí)可根據(jù)說明書的要求控制溫育。室溫溫育時(shí)，ELISA試劑盒只要平置于操作臺上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn)，一個人操作時(shí)，一次不宜多于兩塊板同時(shí)測定。
ELISA測定試劑盒溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2小時(shí)，產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度?？乖贵w反應(yīng)4℃更為*，在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜，以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長，在ELISA試劑盒中一般不予采用。
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CCDC46    卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體                
CCDC63    卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體                
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CCDC61    卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白61抗體                
CCDC8    卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體                
CERK    神經(jīng)酰胺激酶CERK抗體                
CLK2    細(xì)胞分裂周期樣激酶2抗體                
CLK3    細(xì)胞分裂周期樣激酶3抗體                
C17orf49    17號染色體開放閱讀框49抗體                
C17orf53    17號染色體開放閱讀框53抗體                
C17orf57    17號染色體開放閱讀框57抗體                
C17orf64    17號染色體開放閱讀框64抗體                
C17orf66    17號染色體開放閱讀框66抗體                
C17orf74    17號染色體開放閱讀框74抗體                
C17orf75    17號染色體開放閱讀框75抗體                
C17orf77    17號染色體開放閱讀框77抗體                
C17orf78    17號染色體開放閱讀框78抗體                
CDT2    維甲酸調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白抗體                
C17orf42    17號染色體開放閱讀框42抗體 
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